4 superficies maculadas con semen, dos de tela y dos superficies solidas

RECUPERACIÓN DE CÉLULAS ESPERMÁTICAS.

OBJETIVO.

MATERIAL POR EQUIPO.

• 4 superficies maculadas con semen, dos de tela y dos superficies solidas..
• Tijeras.
• Agua destilada.
• Portaobjetos.
• Cubreobjetos.
• Colorante azul de metileno.
• Centrifuga.
• Tubos de ensaye 5ml.
• Gradilla.
• Lámpara de luz bluemax de 460  nm.
• Filtro anaranjado.
• Marcador de aceite.
• Pinzas de disección.
• Microoscopio.
• 4 pipetas pasteur.
• 1 pipeta serológica.
• Kit de fosfatasa ácida.
• Hisopos.
• Papel parafilm.

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PROCEDIMIENTO.

Tinción de espermatozoides.

• Se procederá a la ubicación de células espermáticas utilizando una lámpara de luz con una longitud de onda de 460 nm en un medio oscuro, en el espacio donde se observe la presencia de fluorescencia.
• Aplicar fosfatasa ácida preparada con hisopos para determinar la posible presencia de semen..
• Una vez ubicada la mancha de semen sobre los diferentes tipos de telas y superficies se procederá a marcar el contorno, en el caso de las telas tal zona deberá ser recortada con unas tijeras en el caso de las superficies se levantará con hisopos de algodón.
• Los trozos de tela serán recortados en piezas sumamente pequeñas, se colocaran dentro de un tubo de ensaye, se le agregaran 5ml de agua destilada y s iendo sometidos a un lavado para desprender células espermáticas que pudieran estar presentes, en el caso de la superficies el hisopo del que se recolectó el semen se colocara dentro de un tubo de ensaye y se le adicionaran también 5 ml de agua destilada.
• Una vez lavados los trozos de tela se retiraran del tubo y la suspensión se someterá a centrifugación a 3000 rpm por 20 minutos.
• Decantar, del sedimento obtenido se obtendrá una alícuota misma que se colocará sobre un portaobjetos, secar a fuego.
• Aplicar colorante de metileno y observar la presencia de células espermáticas.

RESULTADOS.

DISCUSIÓN.

Anotar todas aquellas incidencias, eventos o situaciones que intervinieron para llegar al resultado obtenido.

CONCLUSIÓN.

¿Se cumplió el objetivo?

CUESTIONARIO.

1. ¿Qué pruebas existen para la identificación de semen?
2. ¿Qué es la fosfatasa ácida?
3. ¿Además del semen donde más se puede encontrar fosfatasa ácida?
4. ¿Qué es la P30?
5. ¿Qué es el examen diferencial?
6. ¿De qué variables depende la permanencia de semen en la cavidad vaginal?
7. ¿Por qué es importante el examen microscópico?
8. ¿Qué tinciones existen para la identificación de espermatozoides?
9. ¿Es factible identificar semen únicamente con la utilización de las técnicas mencionadas?
10. ¿Qué es el perfil  de ADN?

BIBLIOGRAFIA.

APELLIDO, NOMBRE, OBRA, EDITORIAL, EDICIÓN, PAIS, AÑO, PÁGINAS.

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