Aislamiento de ácidos húmicos y fúlvicos del suelo IHSS

Aislamiento de ácidos húmicos y fúlvicos del suelo IHSS

extracto de — Swift, R.S. 1996 Caracterización de la materia orgánica (cap. 35). págs. 1018-1020. En: D. L. chispas et al. (eds) Métodos de análisis de suelos. Parte 3. Métodos químicos. Ciencia del suelo Soc. Soy. Serie de libros: 5. Ciencias del suelo. Soc. Soy. Madison, Wisconsin

© Soil Science Society of America, usado con permiso.

Se pueden obtener reimpresiones de: Roger S. Swift, CSIRO, PMB 2, Glen Osmond 5064, Australia.

Método de la Sociedad Internacional de Sustancias Húmicas

Se han publicado varios métodos para la extracción de sustancias húmicas del suelo utilizando una solución de hidróxido de sodio. Estos métodos son generalmente exitosos y producen resultados comparables. El siguiente es un método que ha sido desarrollado por la Sociedad Internacional de Sustancias Húmicas (IHSS) como un método aceptable para la extracción de sustancias húmicas de los suelos.

IHSS ha declarado claramente que este no pretende ser un método recomendado o aprobado, sino un método que se ha encontrado satisfactorio para la mayoría de los tipos de suelo y que se puede realizar en la mayoría de los laboratorios. Produce rendimientos relativamente altos y se puede utilizar como método estándar para comparaciones entre laboratorios y dentro de ellos. Un componente importante de este método es el uso de una resina adsorbente en el proceso de purificación. Esto puede ser reemplazado por diálisis si la resina no está disponible (Ver nota sobre diálisis al final del texto).

Materiales

1. Ácido clorhídrico (HCl), 1 M, 6 M

2. Hidróxido de sodio, 1 M, 0,1 M

3. Hidróxido de potasio (KOH), 0,1 M

4. Cloruro de potasio (KCl)

5. Ácido fluorhídrico (HF) concentrado, 0,3 M

6. Resina XAD-8 (Rohm & Haas Co., Filadelfia, PA)

7. Tubos de diálisis Visking (Visking Co., Chicago, IL) [MWCO (límite de peso molecular)] 10 000 dalton

Método:

Retire las raíces y tamice la muestra de suelo seco para pasar un tamiz de 2 mm. Equilibre la muestra a un valor de pH entre 1 y 2 con HCl 1 M a temperatura ambiente. Ajuste el volumen de la solución con 0,1 MHCl para proporcionar una concentración final que tenga una proporción de 10 ml de líquido/1 g de muestra seca. Agite la suspensión durante 1 hora y luego separe el sobrenadante del residuo por decantación después de dejar que la solución se asiente o por centrifugación a baja velocidad. Guarde el sobrenadante (Extracto FA 1) para el aislamiento de ácido fúlvico usando XAD-8.

Neutralice el residuo del suelo con NaOH 1 M a pH = 7 y luego agregue NaOH 0,1 M en una atmósfera de N2 para obtener una proporción final de extractante a suelo de 10:1. Extraiga la suspensión bajo N2 con agitación intermitente durante un mínimo de 4 h. Dejar reposar la suspensión alcalina durante la noche y recoger el sobrenadante por decantación o centrifugación. Acidificar el sobrenadante con HCl 6 M con agitación constante hasta pH = 1 y luego dejar reposar la suspensión de 12 a 16 h. Centrifugar para separar las fracciones de ácido húmico (precipitado) y ácido fúlvico (sobrenadante – Extracto FA 2).

Redisuelva la fracción de ácido húmico añadiendo un volumen mínimo de KOH 0,1 M bajo N2. Agregue KCl sólido para alcanzar una concentración de 0,3 M [K+] y luego centrifugue a alta velocidad para eliminar los sólidos en suspensión. Vuelva a precipitar el ácido húmico agregando HCl 6 M con agitación constante a pH = 1 y deje reposar la suspensión nuevamente durante 12 a 16 h. Centrifugar

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