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leoneldelagBiografía3 de Septiembre de 2015
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Universidad Autónoma de Nuevo León[pic 1] Facultad de Medicina[pic 2] |
Reporte de la Práctica de Determinación De La Actividad De La Lactato Deshidrogenasa (LDH) |
Grupo: 09 Equipo: 01 Materia: laboratorio de bioquímica y biología molecular Nombre del profesor: Alejandro Robles |
26/08/2014
Integrantes del equipo Matricula
Roberto Aarón de Jesús Carrillo Rocha 1583925
Karla Zelea Gamiz Pérez 1567329
Gabriela Antuñano Gómez 1718636
Obed Misael Escalante Mireles 1627707
Rebeca Angelica Davila Flores 1718636
Cyntia Del Carmen Flores Fernandez 1551737
INTRODUCCÍON
La Lactato Deshidrogenasa se va a encontrar presente en todas las células del organismo y sus mayores concentraciones se van a encontrar en el hígado, corazón, músculo esquelético y eritrocitos.
Esta Lactato Deshidrogenasa es principalmente una enzima tetramérica que esta compuesta por cuatro subunidades y es presentada en dos isoformas designadas como M (Por Músculo) O H (Por Corazón). Cuando se combinan estos van a dar origen a 5 isoenzimas que son:
LDH-1(H4) Y LDH-2(H3M)= Estas solo se van a encontrar en el músculo cardíaco y los eritrocitos.
LDH-5(M4)= Esta se encontrara en hígado y músculo esquelético.
LDH-3 Y LDH-4= Se van a encontrar en otros órganos.
Las isoenzimas van a ser formas activas de una enzima con secuencias de aminoácidos ligeramente diferentes y se pueden diferenciar entre ellas, ya que migran de forma distinta durante la electroforesis. La actividad total de LDH va a corresponder a la forma combinada de las isoenzimas del LDH.
La concentración del LDH va a estar aumentada en pacientes con infarto al miocardio, hepatitis viral, necrosis hepática producida por agentes tóxicos, alteraciones renales, distrofia muscular proresiva, y en cualquier causa de hemólisis.
OBJETIVO
Determinar la concentración de la enzima lactato deshidrogenasa y su importancia en el diagnóstico clínico.
FUNDAMENTO
La LDH cataliza a la siguiente reacción:
LDH
PIRUVATO + NADH + H+ LACTATO + NAD+ [pic 3]
La concentración catalítica se determina a partir de la velocidad de desaparición del NADH medido a 340 mm.
MUESTRA
Suero
MATERIALES Y MÉTODOS
Materiales
-Micropipetas de 20 µL y 1000 µL
-Cubetas de 1 cm de paso de luz
Equipo
-Espectrofotómetro
-Centrífuga clínica
-Incubadora a 37°
Reactivos
-Kit para la determinación de LDH
Metodología
- Precalentar el reactivo de trabajo a la temperatura ambiente.
- Calibrar el aparato con 1mL de agua ultapura.
- Pipetear en una cubeta lo siguiente:
Blanco | Problema | |
Reactivo de trabajo | ---------------------- | 1.0 mL |
Muestra | --------------------- | 30 µL |
- Mezclar e insertar la cubeta en el espectrofotómetro. Poer el cronómetro en marcha.
- Pasados 30 segundos anotr la absorbancia inicial y efectuar nuevas lecturas cada minuto durante 3 minutos.
CALCULOS
Calcular disminución de absorbancia por minuto promedio.
Multiplicar por el factor = 8095
Resultado en U/L
Valores normales 105-414 U/L
Discusión
Por parte de la información proporcionada por el libro de trabajo del laboratorio de bioquimica se puede observar que el aumento de la enzima de LDH esta de esta manera representada en pacientes con algún tipo de enfermedades, como lo son el infarto de miocardio, se observa también que esté se encontrara dispersa entre el cuerpo como lo son en el músculo esquelético, en el hígado y otras partes del cuerpo de acuerdo a su tipo de isoenzima, también se sabe que esta representada en dos isoformas que son la M(Músculo) o H(Corazón).
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