Materiales para la preparación de gel de agarosa

Materiales para la preparación de gel de agarosa

Agarosa

Matraz Erlenmeyer

Soporte para gel

Peine

Buffer TAE 1x

Microondas de laboratorio

Bromuro de etidio

Gel de red

Micropipetas

Puntas de micropipeta

Metodología

mezclamos el polvo de agarosa con el buffer TAE 1x en nuestro matraz, lo calentamos en el microondas, periódicamente mezclamos la solución hasta qu este completamente disuelta, una vez mezclado agregamos 3 microlitros de bromuro de etidio o 5 microlitros de gel de red.

Posteriormente vertemos el gel de agarosa en el soporte de gel e inmediatamente colocamos el peine, pasados 15 min retiramos el peine con extremo cuidado, (nuestro gel debe de estar polimerizado), cuidando de no dañar los pocillos.

Cargamos nuestro DNA en el gel, para lo que utilizamos un buffer de carga, con una micropipeta tomamos 2 microlitro de buffer y lo agregamos a la muestra posteriormente con la punta de la micropipeta depositamos la muestra en los pocillos del gel junto con su marcado y encendemos la cámara de electroforesis

Añadimos nuestro buffer TAE 1x en la cámara de electroforesis y después el gel, cuidando que quede completamente sumergido

Una vez que empiece a correr la muestra cuando leve aproximadamente un 80%pararemos la electroforesis y retiramos el gel y el soporte de la caja de electroforesis para colocarlo en un transimulador para revelarlo.

Como punto final comparamos las bandas de la muestra de DNA con las bandas del marcador, e ingresamos la longitud estimada en pares de bases, para cada banda.

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