Aislamiento De Bacterias Anhidrobiontes
Enviado por narei • 11 de Diciembre de 2012 • 209 Palabras (1 Páginas) • 568 Visitas
Ensayo de tolerancia a la desecación.
Para calcular la tolerancia a la desecación se partió de colonias aisladas procedentes de
placas de TSA de 48 horas de crecimiento. Utilizando un asa estéril se tomó una única
colonia que se resuspendió en 1 ml de solución M9 estéril. Partiendo de esta suspensión
celular se realizaron diluciones seriadas que se sembraron en placas de TSA con objeto
de identificar el número de UFC/ml de partida. Por otra parte se tomaron 100 μl de cada
suspensión y se depositaron en gotas de 5-10 μl sobre microplacas de petri estériles sin
medio. Las microplacas se situaron bajo una corriente de aire estéril en una campana de
flujo laminar durante 24 horas. Las placas quedaron secas tras 2-3 horas de incubación.
Trascurridas las 24 horas de incubación se resuspendieron en 1 ml de solución M9
estéril. Partiendo de esta solución se realizaron diluciones seriadas que se sembraron en
placas de TSA. Del recuento de UFC/ml de esta segunda siembra se calcularon las
proporciones de supervivencia en referencia al primer conteo. Estos ensayos se
realizaron por triplicado. Los resultados se expresaron como la media de los tres
ensayos, en porcentaje tomando como referencia del 100% los datos húmedos. La
desviación estándar a la media permitió el cálculo de la T de student para estudiar si las
diferencias en supervivencia fueron significativas.
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