Aislamiento De Caseina Y Lactosa

Como primer paso durante el procedimiento se calentó la leche descremada a utilizar, con el fin de que se precipitara la caseína contenida en la leche. La caseína es una proteína conjugada de la leche del tipo fosfoproteína se encuentra en forma de sal cálcica (caseinato cálcico) que se separa de la leche por acidificación, el siguiente paso fue añadir ácido acético al 10% 11 ml a 40°C con el fin de que la leche alcanzara un pH de 4,6 (su punto isoeléctrico: PH en que una sustancia tiene carga neta de cero) si no se llega a este PH la precipitación nunca ocurrirá. Al llegar al punto isoeléctrico se disuelve el fosfato de calcio (los grupos fosfato se protonan), comienza la precipitación de la caseína y pasa lo que sucede con la desnaturalización de las proteínas en este caso la proteína de la leche; caseína pierde su estructuras de orden superior (ya sea secundaria, terciaria y cuaternaria), quedando la cadena polipéptidica reducida a un polímero estadístico sin ninguna estructura tridimensional fija.

Al instante comienzan a formarse grumos en la superficie (la leche se cortó) reacción que indica la precipitación de la caseína. Toda la sustancia solida se retira y del filtrado de la leche descremada se obtiene el suero líquido, el cual presentó un color amarillo mientras que el residuo fue un sólido blanco que finalmente formo una masa amorfa. Luego de tres días su peso fue de 7.3 gr. El siguiente paso fue agregar carbonato de calcio al suero para decolorar la solución y a la vez neutralizar el ácido. Al calentar, el carbonato de calcio comienza a precipitarse en el fondo del beacker con un color blanco, precipitando además casi por completo las albuminas o proteínas del suero permitiendo retirarlas para proceder al aislamiento de la lactosa. Se concentró la solución hasta 30 mililitros para eliminar agua, luego de apartar la solución del mechero agregamos etanol 175 ml al 95% y 1.5 gr de carbón activo a la solución aún caliente esto para deshidratar y llevar a la desestabilización de las micelas. Luego de batir bien, se filtra al vacío para extraer los sólidos ajenos a la lactosa a traves de un papel filtro. El filtrado transparente se coloca en un Erlen meyer, 3 dias después se encontró precipitado en el fondo y las paredes del mismo. El cual fue filtrado al vacío, lavado con etanol acuoso y guardado en un sobre para dejar que secara. Con el producto ya seco se procede a pesarlo obteniendo finalmente 1.5 gr de lactosa.

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