BIOTECNOLOGIA

FUNDAMENTO TEORICO

El método DNS es una tecnica colorimétrica que emplea ácido 3,5 dinitrosalicílico para la hidrólisis de polisacáridos presentes en una muestra. Determina las absorvanciaspor medio de un espectrofotometro a 540nm. Esta tecnica sirve para cuantificar los azucares reductores producidos durante una fermentacióno para cuantificar los productos de una reacción enzimática, la curva de calibración es la representación grafica en un eje de coordenadas, de la absorvancia (eje de coordenadas Y) frente a la concentración (eje de abcisas X). Se ensayan varias soluciones de concentracion conocida y se determinan sus absorvancias, constituyendose la curva de calibrado, que es una recta. La concentracion de una solucion problema (desconocida), se averuga por interpolación de la abs de la solucion en la curva de calibración, o a través de la ecuación de la recta (y = mx + B) donde: Absorvancia (Y) = constante (m) x concentracion + absorvancia del blanco.

El DNS reacciona únicamente con los azucares reductores. La sacarosa es un disacáridono reductor, pero tras su hidrólisis en medio ácido se liberan glucosa y fructuosa que sí son reductores y reaccionan con el DNS generando un producto coloreado. La intensidad del color, que se puede medir por métodos espectrofotométricos es proporcioanl a la sacarosa.

Fig. Reacción quimica de la reaccionde DNS en presencia de un azucar reductor (Glucosa)

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