Calibración De Micropipetas Por Espetrofotometria
Enviado por Cilenyctrlw • 9 de Octubre de 2014 • 233 Palabras (1 Páginas) • 645 Visitas
PRÁCTICA No. 5
CALIBRACIÓN DE LA MICROPIPETA POR ESPETROFOTOMETRÍA
OBJETIVO
El estudiante aprenderá a usar adecuadamente las micropipetas y a verificar el buen funcionamiento de las mismas por el método espectrofotométrico con solución de azul de metileno.
INTRODUCCION
El desempeño inadecuado de los instrumentos en el laboratorio clínico es una de las causas que con mayor frecuencia produce errores en el laboratorio clínico y su control es una tarea inherente e indelegable del profesional a cargo del mismo.
La micropipeta puede perder su calibración. Comprobar la calibración de la micropipeta es un procedimiento simple que puede ahorrar tiempo considerable, energía, y reactivos. En esta práctica aprenderá a usar la micropipeta de tamaños diversos medir su exactitud, precisión y calibración.
MATERIAL, REACTIVOS Y EQUIPO
1. Espectrofotómetro
2. 20 Celdas de 1 cm
3. Micropipetas semiautomática de diferentes volúmenes.
4. Puntas para micropipeta.
5. Solución de azul de metileno.
6. Agua destilada
PROCEDIMIENTO
a) Encender el equipo 15 minutos antes de iniciar la práctica.
b) Seleccionar la longitud de onda de 660nm.
c) Seleccionar la micropipeta (usando volúmenes diferentes Ej: volúmenes de 500 µL, 1000 µL, 20 µL, 100 µL) y las puntas adecuadas.
d) Tomar 1 ml de agua destilada y dispénselo en cada celda.
e) Fijar la celda en el portaceldas y ajuste el 100.0% de transmitancia, para eliminar interferencias debido al blanco.
f) Tomar el volumen de la solución de azul de metileno con la micropipeta y dispénselo en la celda.
g) Mezclar.
h) Registrar la absorbancia.
i) Repita el procedimiento cinco veces para cada volumen.
j) Cálculo de la exactitud (E%) y del coeficiente de variación (CV%)
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