Ejercicios prácticos de bioquímica: Ley de Beer - Lambert

Deber 1 | Práctica 1

1. Transmitancia desde k·c·b

En suero canino se mide bilirrubina total.

ε (k): 6.0 mM⁻¹ cm⁻¹ | b: 1 cm | c: 0.020 mM

1. Calcule la absorbancia (A)

A= 6.0 x 1.0 x 0.020=0.120

A= 0.120

b) Obtenga la transmitancia (% T)

T= 10−0.120=  0.75857775

T= 0.75857775 x 100= 75.85%

T= 75.85%

2. Absorbancia usando k·c·b

Para descartar sangrado gingival se mide HbO₂ en saliva.

ε: 11 mM⁻¹ cm⁻¹ | c: 0.010 mM | b: 1 cm

a) Calcule la absorbancia (A).

A= 11 x 0.010 x 1=0.110

A=0.110

3. Concentración a partir de A, k y b

En plasma humano se obtiene A = 0.350 a 505 nm.

ε: 6.5 mM⁻¹ cm⁻¹ | b: 1 cm

PM GLUCOSA: 180.16 g X mol-1= 180.16 mg X mmol-1

a)Determine la concentración (mM)

A= K x C x B ⇒ C= A/K x B

C= 0.350/ 6.5 x 1.0= 0.350/6.5=0.05384mM

C= 0.053mM

1. Conviértala a mg/dL.

Mg/dL=0.053 mmol/L×180.16 mg/1mmol​ ÷10

Mg/dL= 0.053 x 180.16= 9.54

Mg/dL= 9.54÷10=0.954

Mg/dL= 0.95 mg/dL

4. Beer–Lambert

En 2–3 líneas, explique por qué la Ley de Beer–Lambert es fundamental para cuantificar analitos mediante pruebas bioquímicas colorimétricas (por ejemplo, reactivos de glucosa-oxidasa, bilirrubina, transaminasas) usando el espectrofotómetro, aprovechando que cada indicador desarrolla un color específico.

5. Buenas prácticas de espectrofotometría

Enumere cuatro acciones clave para lograr resultados reproducibles y confiables al medir sangre o suero.

6. Interpretación clínica de un valor extremo

Glucosa (sangre venosa en ayunas): 0.97 mg/dL

Rango de referencia: 70 – 110 mg/dL | Variabilidad analítica: ± 5 %

a) ¿Es fisiológicamente plausible?

b) Sugiera una causa técnica.

c) Indique la acción inmediata.

Pista: Piensa cuánto tarda la glucosa en consumirse si la muestra no se procesa ni refrigera.

7. Estadística básica (datos de glucosa)

Siete replicados de la misma muestra (mg/dL): 95, 92, 210, 93, 94, 96, 97

a) Calcule media, mediana y moda.
b) Calcule la desviación estándar y, con base en su magnitud, juzgue si la dispersión es alta o baja y discuta las implicaciones clínicas.

8. Molaridad y molalidad en soluciones clínicas

a) Para 0.9 % NaCl (9 g NaCl/L, densidad ≈ 1 g mL⁻¹) calcule: Molaridad (M) y molalidad (m).
b) Para 5 % dextrosa (D5W) (50 g glucosa/L) calcule igualmente M y m.

9. Osmolaridad vs. tonicidad

a) Diferencie entre valor osmolar de una solución y el hecho de que sea hipo-, iso- o hipertónica.

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