“HIDROLISIS DE DNA E IDENTIFICACIÓN DE LAS BASES PURICAS Y PIRIMIDICAS ”

Instituto Politécnico Nacional

Escuela Nacional de ciencias Biológicas

Departamento de bioquímica

“HIDROLISIS DE DNA E IDENTIFICACIÓN DE LAS BASES PURICAS Y PIRIMIDICAS ”

Profesor: Ramiro García Guzmán

Autores:

González Muñoz Karen

Sosa Hernández Nicolás

Grupo: 4QV1 Sección: 1

Introducción:

Los ácidos nucleicos son compuestos nitrogenados de elevado peso molecular que se pueden encontrar en las células asociados a proteínas formando complejos llamados núcleo-proteínas. Estas proteínas tienen carácter básico mientras que los ácidos nucleicos son ácidos. Se conocen dos grupos de ácidos nucleicos: RNA (ácido ribonucleico) y el DNA (ácido desoxirribonucleico). La hidrólisis controlada de RNA y DNA produce nucleótidos. Si la hidrólisis continúa se producen nucleósidos y finalmente fosfatos, azúcares y bases púricas y pirimidínicas. La función biológica de los ácidos nucleicos es fundamental: el DNA está asociado con el material genético de las células, pudiendo encontrarse como una sola cadena en algunos microorganismos o formando parte de núcleo-proteínas de los cromosomas en organismos superiores. Almacena información genética y sirve de molde para la síntesis de proteínas. Se encuentra mayoritariamente en el núcleo y en muy poca cantidad en mitocondria y cloroplastos. El RNA participa en la síntesis de proteínas y se distribuye en toda la célula, mayormente en citoplasma en forma soluble o formando parte de los ribosomas.

Objetivos:

Separar las bases nitrogenadas del DNA y el RNA por cromatografía en capa fina a partir de hidrolizados de los mismos, identificandolas por la propiedad que tienen de absorber luz ultravioleta.

Resultados:

Tabla 1. Datos de el espectro de absorción del DNA

λ (nm)

Abs

λ (nm)

Abs

200

0.379

255

0.638

205

0.155

260

0.691

210

0.003

265

0.714

215

-0.100

270

0.700

220

0.048

275

0.598

225

3.000

280

0.486

230

0.539

285

0.361

235

-0.013

290

0.238

240

-0.235

295

0.146

245

0.203

300

0.086

250

0.077

Gráfica 1. Espectro de absorción del DNA

Concentración:

Acidos nucleicos

1A260 → 0.05mg/mL

0.691 → X X= 0.034 mg/mL

Determinación de la concentración por nomograma

Imagen 1 Determinación de la concentración por el método de monograma

Imagen 2 Identificación de bases púricas y pirimídicas por el método de Cromatografía en capa fina

Donde observamos para DNA que las manchas más visibles coinciden con Citosina Adenina y Guanina

Y en RNA se observan manchas que coinciden con Citosina Adenina Guanina y Uracilo.

Discusión:

Las bases nitrogenados tanto de DNA como de RNA poseen la propiedad de absorber fuertemente la luz ultravioleta en una región de 260-280nm, por lo que mediante esta propiedad se leyeron las absorbancias del DNA obtenido de la guayaba a distintintas longitudes de onda (200-300nm) con intervalos de 5 en 5, con lo que posteriormente se construyó el espectro de absorción característico del DNA y se calculó la concentración del mismo mediante el método del nomograma y el método matemático, los cuales arrojaron resultados muy similares.

Se llevó a cabo una hidrolisis

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