Anasis Micro Del Agua Filtracion Por Membrana

INTRODUCCIÓN

El agua es un factor importante en la producción de los medicamentos, por lo tanto su calidad, es de suma importancia ya que es la materia prima más usada y además está presente en otros procesos relacionados con dicha producción, como por ejemplo en los de limpieza y sanitarización. Es por ello que el agua puede considerarse una fuente potencial de contaminación bacteriana de los medicamentos. En la industria farmacéutica se conocen cinco tipos de agua: agua potable, agua suavizada, agua des ionizada, agua destilada y agua producida por ósmosis reversa. La calidad microbiológica de cualquier tipo, dependerá del contenido microbiano del agua utilizada como materia prima, de los métodos de tratamientos a los que es sometida, y de los sistemas empleados para su almacenamiento y distribución. Para garantizar la calidad microbiológica del agua, es necesario realizar el control de la misma, utilizando diferentes métodos, que nos permitan realizar la numeración o el recuento de bacterias aerobias mesófilas, mohos y levaduras, coliformes o la investigación de microorganismos patógenos.

OBJETIVO: realizar el control microbiológico del agua de proceso, utilizando la técnica de la Membrana Filtrante.

FUNDAMENTO

Este método se fundamenta en determinar el número y tipo de microorganismos

presentes en una muestra de agua de proceso, por medio de la filtración de la

misma a través de una membrana filtrante con poros de tamaño adecuado (0,45

μm de diámetro), la consiguiente retención de los microorganismos sobre dicha

membrana y el cultivo de los mismos en diferentes agares de acuerdo al tipo de

microorganismo.

MATERIALES

Muestra de agua de proceso

Agua peptonada al 0,1 %

Placas estériles con medio ENDO

Membranas filtrantes estériles

Bomba de vacío

Pinzas estériles

Estufa

PROCEDIMIENTO

1. Colocar una membrana filtrante estéril, bajo condiciones asépticas, sobre el

centro del portafitro, usando pinzas estériles, con la superficie cuadriculada

hacia arriba.

2. Ensamblar el equipo, colocando el dispositivo de filtración y asegurando con

una pinza.

3. Verter 100 mL de la muestra de agua, en el portafiltro y proceder a filtrar.

4. Lavar el embudo con aproximadamente 100 mL de agua peptonada al 0,1%.

5. Remover la parte superior del portafiltro, y con una pinza estéril transferir la

Membrana a la placa de Petri que contiene el medio de cultivo correspondiente

al microorganismo que se va a identificar: Coliformes en agar endo, bacterias

aerobias mesófilas en agar para recuento en placas, mohos y levaduras en

agar Sabouraud y Pseudomonas aeruginosa en agar cetrimide.

6. Al colocar la membrana, evitar la formación de burbujas entre ésta y el medio

de cultivo.

7. Esperar aproximadamente 20 minutos, para permitir la adhesión de la membrana

al medio.

8. Con excepción de las placas de agar Sabouraud, incubar las placas en forma

invertida, a las diferentes temperaturas y tiempos, de acuerdo al microorganismo

investigado:

1. Coliformes: Agar ENDO Incubación 35ºC ± 2ºC x 24-48 h

2. Mohos y Levaduras: Agar Sabouraud Incubación 25ºC ± 2ºC x 5-7 días

3. Bacterias aerobias Agar Recuento Incubación 35ºC ± 2ºC x 24-48 h

mesófilas en Placas

4. Pseudomonas aeruginosa Agar cetrimide Incubación 35ºC ± 2ºC x 24-48 h

RESULTADOS

Contar las colonias en las membranas.

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