Bioquimica

RSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD ESCUELA DE CIENCIAS BASICAS TECNOLOGIA E INGENIERIA GUIA COMPONENTE PRÁCTICO DEL CURSO: 201103 – BIOQUÍMICA

6. DESCRIPCIÓN DE PRÁCTICAS

PRACTICA No. 1: METODOS CUALITATIVOS PARA LA IDENTIFICACION DE AMINOACIDOS Y PROTEINAS

Tipo de practica Presencial X Autodirigida Remota Otra ¿Cuál

Porcentaje de evaluación 2,5% Horas de la practica 1 H Temáticas de la práctica Unidad 1: Biomoléculas, específicamente el capítulo 1, aminoácidos y capítulo 2, péptidos y proteínas. Intencionalidades formativas Propósitos

Reconocer a los aminoácidos como unidades estructurales de las proteínas y su importancia en los diferentes procesos metabólicos.

Analizar, mediante reacciones cualitativas coloreadas la presencia de aminoácidos y enlaces peptídicos en las muestras.

Establecer relaciones entre la estructura y la función de las proteinas y pérdida de esta al variar su pH y solubilidad (precipitación y desnaturalización).

Objetivos

Que el estudiante reconozca los aminoácidos como unidades estructurales de las proteínas. Que el estudiante analice, mediante reacciones cualitativas coloreadas la presencia de aminoácidos y enlaces peptídicos en las muestras.

Que el estudiante establezca la relación entre la estructura y la función de las proteinas y pérdida de esta al variar su pH y solubilidad (precipitación y desnaturalización).

COMPETENCIAS

El estudiante describe y analiza de manera eficiente los resultados observados en cada prueba cualitativa y relaciona el marco teórico y los resultados para dar el respectivo análisis.

El estudiante conceptualiza en forma precisa la relación que tiene cada prueba y la estructura de aminoácidos y proteínas.

El estudiante comunica los conocimientos adquiridos a a través de la elaboración de informes escritos.

Metas

Al finalizar la práctica #1:

El estudiante obtendrá su calificación del respectivo pre informe personal como resultado del estudio independiente.

El estudiante resolverá los respectivos cuestionarios dados.

El estudiante presentará en forma escrita el informe del respectivo laboratorio en forma grupal en donde sobresalga el análisis de resultados.

Fundamentación Teórica

El estudiante como parte de su autogestión en el desarrollo de su aprendizaje autónomo, se servirá investigar antes de la práctica y a manera de pre informe los siguientes temas:

1. Capítulo 1 y 2 de la Unidad 1: Biomoléculas del módulo del curso, enfatizando en:

• Clasificación de aminoácidos

• Enlace peptídico

• Niveles de estructuración

• Solubilidad de proteínas: desnaturalización por calor y pH extremos. Precipitación por metales pesados, Precipitación acídica

2. Pruebas cualitativas: enfatizar en las reacciones químicas que tienen lugar y el principio del método.

1. Reacción de la ninhidrina

2. Reacción xantoproteica

3. Reacción de millón

4. Reacción del ácido glioxílico

5. Prueba de Pauly

6. Prueba del Nitroprusiato

7. Reacción de Sakaguchi

8. prueba de Biuret.

Descripción de la practica

En esta práctica mediante pruebas coloreadas, se identifica los aminoácidos que componen las proteínas de los extractos utilizados basados en las reacciones de los grupos R ó cadena lateral.

Se desarrolla pruebas para analizar el comportamiento y la solubilidad de proteínas en tratamientos de precipitación y desnaturalización.

Estas prácticas corresponde a los temas que se tratan en la Unidad 1: Biomoléculas, específicamente el capítulo 1, aminoácidos y capítulo 2, péptidos y proteínas.

Es de vital importancia para los estudiantes de la formación profesional y técnica de los programas de ingeniería de alimentos, agroforestal, agronómica, zootecnia, producción animal y regentes de farmacia, el desarrollo de estas prácticas, ya que profundizan y analizan la relación e importancia que guardan los aminoácidos y la función biológica de las proteinas en los tejidos biológicos.

Recursos a utilizar en la práctica (Equipos / instrumentos)

Material de vidrio Material biológico y otros (estudiantes)

Reactivos Equipos

Tubos de ensayo Alimento de origen vegetal o animal: concentrados, proteína cárnica, hígado, huevo, etc.

Reactivo de millón Estufas ( 5)

gradillas tapabocas Agua destilada, Solución de CuSO4 1%

pHmetro (1)

espátulas Libros de bioquímica Solución NaOH 30% y 40%, Solución saturada de NaCl

Centrifuga

Pipetas 1, 5 y 10 ml

Marcador de vidrio HNO3 concentrado, Cristales de sacarosa

Balanza analítica

Mallas de asbesto Cinta para rotular HCl concentrado, Acido triclorácetico 10%

Termómetros 120 ºC

Papel filtro Cuaderno de laboratorio Solución ácido pícrico saturada, Etanol 95%

mecheros

Embudos Bata blanca Solución de (NH4SO4) al 50%, acetona

Espectrofotómetro

Agitador de vidrio Marcador para vidrio Solución de acetato de plomo 0.5 %

Erlenmeyers 100 y 250 ml

Reactivo de sakaguchi, Ácido acético glacial

Vasos de precipitado 250 ml

HSO4 concentrado, Acido acético al 30%

Vasos precipitado 500 ml

Aminoácidos: glicina, tirosina, triptófano, aminoácidos azufrados, leucina

Probeta 100 ml Ninhidrina ( 2g/l) prepárese en fresco, Hidróxido de amonio.

Pinzas para tubos en madera

Ácido sulfanilico (10 g/l en solución de HCl 1 mol/l).

Vidrios reloj grandes

Nitrito de sodio, Carbonato de sodio

Mortero con mango

Acetato de plomo, Nitrato de mercurio.

Soporte para embudos

Nitroprusiato de sodio (20 g/l, prepárese fresco).

Pinzas para tubos de ensayo metálicas

Alfa- naftol, Agua de bromo

Vasos de precipitado de 1000 ml plástico

Ácido fosfórico, Molibdato de sodio

Vasos de precipitado de 600 plástico

Tungsteno de sodio, Sulfato de cobre, Nitrato de sodio

Tabla 1: reactivos práctica 1.

Software a utilizar en la práctica u otro tipo de requerimiento para el desarrollo de la práctica

Objeto de Aprendizaje (OA): pruebas cualitativas para determinar aminoácidos y proteínas partes 1 y 2.

Ubicación: Página principal del curso, tópico Unidad 1.

Seguridad Industrial

REACTIVO PROTECCION RIESGO

Ácidos inorgánicos concentrados

Gafas de seguridad, tapabocas.

Metodología

Conocimiento previo pa ra el desarrollo de la práctica:

1. Capítulo 1 y 2 de la Unidad 1: Biomoléculas del módulo del curso .

Forma de trabajo: Estimado estudiante a continuación encontrará los pasos a seguir para el desarrollo de la práctica #1 del curso.

La metodología es la siguiente:

Trabajo individual: el estudiante obtiene las guías de laboratorio, prepara un pre informe que contenga: resumen conocimientos previos, diagrama de flujo de la marcha de la práctica y tabla de resultados en blanco.

Trabajo grupal: En grupo de trabajo, todos los estudiantes realizan la práctica #1 de laboratorio, para ello previamente deben identificar los materiales que se requiere. Tenga presente que el desempeño individual como grupal, serán tenidos en cuenta en la rúbrica de evaluación del informe de laboratorio.

Producto a entregar: Informe escrito de laboratorio mediante entrega personal al tutor.

Procedimiento:

1. Pruebas Cualitativas

1. 1 Obtención de los Extractos:

-En el caso de alimentos en polvo, coloque unos 30 gramos en un vaso de precipitado, agregue 100 ml de agua destilada, agite durante 10 minutos y filtre a través de tela limpia. Conserve el líquido (filtrado) para las pruebas de las proteínas.

-En el caso de los alimentos concentrados ó sólidos, muélala o macérelas por separado y recoja el molido en vasos de precipitado. Agregue 100 ml de agua destilada, agite durante 10 minutos y filtra a través de tela. Recoja los filtrados en vasos de precipitado o en Erlenmeyers previamente marcados. Deseche los residuos.

-En el caso de la solución de clara de huevo: Haga un pequeño orificio en uno de los extremos del huevo y vierta por él la clara en un vaso precipitado, dejando dentro la yema. Luego agregue a la clara 100 ml de agua destilada y agite con el fin de disolverla.

Marcha de la práctica:

Prueba PROCEDIMIENTO

en un tubo de ensayo colocar :

VOLUMEN RESULTADO ANALISIS DEL RESULTADO

Biuret extracto problema 2 ml

NaOH al 30% 2 ml

Mezclar e ir añadiendo gota a gota el sulfato cúprico al 1% (CuSO4), agitando después de cada adición, hasta la aparición de un color violeta, azul o amarillo. El color violeta indica la reacción positiva.

MILLON

extracto problema 2 ml

Reactivo de millón 0.5 ml

XANTOPRO-

TEICA

extracto problema 2 ml

HNO 3 concentrado ( observar ) 1m

Mezclar bien, calentar a la baño maría y observar. Adicionar solución de NaOH al 40% lentamente sin agitar y observar.

2 ml

LIEBERMAN

extracto problema 2 ml

Cristales de sacarosa Una pizca

HCl concentrado

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