Ecologuia Dox

Portaobjetos

Lamina de vidrio rectangular de color transparente utilizada para almacenar muestras y objetos con el fin de observarlas bajo el miscroscopio. Las dimensiones tipicas de un portaobjeto son de 75mm x 25mm, sin embargo estan pueden variar dependiendo del tipo de objeto o muestra (en geologia suelen utilizarse portaobjetos de 75 x 50 mm).

Para mantener la muestra segura, se utiliza un cubreobjeto que es colocado sobre la muestra bajo el portaobjeto. El cubreobjeto es una lamina cuadrada o rectangular similiar al portaobjeto pero de menores dimensiones

Los portaobjetos pueden estar hechos de vidrio, vidrio borosilicatado, y plastico.

http://www.tplaboratorioquimico.com/laboratorio-quimico/materiales-e-instrumentos-de-un-laboratorio-quimico/portaobjetos.html

Cristal violeta

Compuesto químico

El violeta de metilo, comúnmente denominado cristal violeta o violeta de genciana, es el nombre dado a un grupo de compuestos químicos empleados como indicadores de pH y colorantes. Wikipedia

Fórmula: C24H28N3Cl

Punto de fusión: 137 °C

el cristal violeta, teñirá las bacterias de acuerdo a la clasificación de tinción en Gram (+) (color entre morado o violeta o rojo).

Lugol

El lugol o disolución de Lugol es una disolución de yodo molecular I2 y yoduro potásico KI en agua destilada. Se preparó por primera vez en 1829 y recibe su nombre en honor al médico francés J.G.A. Lugol

Este producto se emplea frecuentemente como desinfectante y antiséptico, para la desinfección de agua en emergencias y como un reactivo para la prueba del yodo en análisis médicos y de laboratorio.

También se ha usado para cubrir deficiencias de yodo; sin embargo, se prefiere el uso de yoduro potásico puro debido a la ausencia de yodo diatómico, forma molecular cuyo consumo puede resultar tóxico.

Fórmula

Consiste en 20 gramos de yodo metálico y 40 gramos de yoduro potásico, disueltos en 1 litro de agua destilada. El yoduro potásico facilita la disolución del yodo diatómico, debido a la formación de iones triyoduro I3-.

No debe confundirse el lugol con la tintura de yodo, que consiste en yodo diatómico y sales de yodo disueltos en una mezcla de agua y alcohol etílico (etanol). La disolución de Lugol no contiene alcohol.

La función del yodo- lugol, funciona como fijación de la preparación, y tambien actua sobre la pared de las bacterias Gram(+)

Alcohol-acetona

Mezcla de alcohol acetona en proporción 3:1 para la coloración de Gram. Líquido inflamable y muy volátil, manéjese con precaución y utilizando los elementos de seguridad en el laboratorio

Metanol: 75% Acetona: 25%

Al agregar el decolorante (alcohol-cetona) no se destiñan las bacterias que ya se tiñeron, al agregar la Safranina

Safranina

La safranina (también llamada Safranina O o rojo básico 2), es un colorante biológico, de contraste que se utiliza en la Tinción de Gram para proporcionar un color violeta más intenso a las bacterias Gram+ y tiñe de rosa a las bacterias G- ; en histología y en citología. La safranina se usa como líquido de contraste en algunos protocolos de tinción, coloreando el núcleo celular de rojo. También para detectar cartílago,mucina y gránulos de mastocitos.

En síntesis

El Lugol entra en las células y forma un complejo insoluble con el cristal violeta

La mezcla de alcohol-acetona sirve para realizar la decoloración. Las bacterias Gram positivas no se decoloran, mientras que los Gram negativas sí lo hacen.

Para poner de manifiesto las bacterias gramnegativas se utiliza una coloración de contraste de color rojo; safranina ó fucsina. Después de la coloración de contraste las células gramnegativas son rojas, mientras que las grampositivas permanecen azules.

Penicilina

Mecanismo de acción Los antibióticos ß-lactámicos comparten un mecanismo de acción común: la inhibición de la síntesis de la pared de péptidoglicano de la bacteria. Por eso se los considera antibióticos de gran seguridad, ya que las células eucariotas carecen de pared bacteriana. Inhiben la etapa final de la síntesis, es decir, la reacción de entrecruzamiento entre los polímeros de peptidoglicanos. Esta etapa se encuentra catalizada principalmente por dos clases de enzimas: carboxipeptidasa y transpeptidasa, las cuales están ancladas a la membrana plasmática de la bacteria. A estos tipos de proteínas se las denominan PBP (proteínas ligadoras de penicilinas). Es aquí, donde se fijan los ß- lactámicos, inhibiéndolas en forma no competitiva, irreversible. Todas las bacterias poseen este tipo de proteínas, variando en su número y afinidad de unión por diferentes antibióticos ß-lactámicos según cual sea la bacteria; por ejemplo, los Staphylococcus aureus tienen cuatro PBP, en tanto que la E. coli posee como mínimo siete. En términos generales, las PBP intervienen en: • el crecimiento de la bacteria; •

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