El método de lowry para determinar el nivel de proteína total en la solución
Enviado por jorge9302 • 3 de Septiembre de 2013 • Informes • 345 Palabras (2 Páginas) • 924 Visitas
El ensayo de proteínas de Lowry es una bioquímica ensayo para la determinación del nivel total de proteína en una solución. La concentración de proteína total es exhibida por un cambio de color de la solución de la muestra en proporción a la concentración de proteína, que luego se puede medir usando colorimétricos técnicas. Se llama así por el bioquímico Oliver H. Lowry quien desarrolló el reactivo en la década de 1940. Su artículo de 1951 que describe la técnica es la más altamente citados papel cada vez en la literatura científica, citado más de 200.000 veces. [ 1 ] [ 2 ]
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1 Mecanismo
2 Véase también
3 Referencias
4 Enlaces externos
Mecanismo [ fuente de edición | edición beta ]
El método combina las reacciones de los iones de cobre con los enlaces peptídicos bajo alcalinas condiciones (la prueba de Biuret ) con la oxidación de aromáticos proteínas residuos. El método de Lowry se utiliza mejor con concentraciones de proteína de 0,01 a 1,0 mg / ml. y se basa en la reacción de Cu + , producido por la oxidación de los enlaces peptídicos, con reactivo de Folin-Ciocalteu (una mezcla de ácido fosfotúngstico y ácido fosfomolíbdico en la reacción de Folin-Ciocalteu). El mecanismo de reacción no se entiende bien, pero implica la reducción del reactivo de Folin y la oxidación de aromáticos (principalmente residuos de triptófano , también tirosina ). Los experimentos han demostrado que la cisteína también es reactiva con el reactivo. Por lo tanto, los residuos de cisteína en la proteína probablemente contribuyen también a la absorbancia visto en el ensayo de Lowry. [ 3 ] La concentración del reactivo de Folin reducida se mide por absorbancia a 750 nm. [ 4 ] Como resultado, la concentración total de proteína en la de la muestra se puede deducir a partir de la concentración de Trp y Tyr residuos que reducen el reactivo de Folin.
El método fue propuesto por primera vez por Lowry en 1951. El ensayo del ácido bicinconínico y el ensayo Hartree-Lowry son modificaciones posteriores del procedimiento original Lowry.
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