“FIBRINÓGENO”

    INSTITUTO MEXICANO DEL SEGURO SOCIAL

CURSO PROFESIONAL TÉCNICO LABORATORISTA CLÍNICO

HGZ 68 TULPETLAC

“FIBRINÓGENO”

FIBRINÓGENO

OBJETIVO

Obtener el tiempo de actuación del fibrinógeno en una muestra sanguínea. 

INTRODUCCIÓN

Para la determinación de fibrinógeno se emplea sangre venosa con anticoagulante citrato sódico, previamente centrifugado. No es necesaria una preparación previa del paciente. Las muestras no centrifugadas o las centrifugadas sin separar el plasma de los componentes celulares se pueden conservar hasta 4 horas a temperatura ambiente. El plasma separado (sin células) se puede conservar hasta quince días a -20ºC o hasta seis meses a -70ºC. Es necesario descongelar los plasmas a 37ºC justo antes de ser utilizados.

El método que aporta más información es el coagulativo de Clauss, que valora el fibrinógeno funcional. Dicho método mide la tasa de conversión del fibrinógeno en fibrina en presencia de una concentración elevada de trombina (70-100 U/ml). El tiempo de coagulación medido es inversamente proporcional a la concentración de fibrinógeno.

FUNDAMENTO

La determinación de fibrinógeno se realiza agregando un exceso de trombina, para "superar” cualquier inhibidor de la trombina (tal como antitrombina activada con heparina). El grado de coagulación con la trombina es una función de la concentración de fibrinógeno o de la concentración de los inhibidores que impiden la reacción trombina-fibrinógeno

JUSTIFICACIÓN

• La determinación de fibrinógeno por el tiempo de coagulación de trombina, está basada en el método descrito por Clauss. En presencia de altas concentraciones de trombina, el tiempo necesario para la formación del coágulo en el plasma diluido es inversamente proporcional a la concentración de fibrinógeno.

MATERIAL

• Muestra de sangre venosa 4.5 ml de sangre con 0.5 ml de oxalato de sodio 0.1 M.
• Reactivo multifibren (reactivo de para fibrinógeno y plasma control).
• Buffer de barbital pH 7.6
• Tubos de ensaye 10x75 mm.
• Pipetas de 0.2 ml
• Pipetas de 1.0 ml
• Pipetas Pasteur de tallo largo.
• Bulbos de hule.
• Baño María a 37°C.
• Centrifuga.
• Cronómetro.

METODOLOGÍA

1. Recolectar muestra sanguínea venosa
2. Agregar reactivo Multifibren. Buffer de barbital pH 7.6
3. Centrifugar la sangre a 3000 rpm durante 5 minutos
4. Preparar alícuotas con 0.2 ml de Multifibren que ha sido reconstituido con 2 ml de agua destilada
5. Se cuenta con una dilución 1:10 de plasma problema con buffer de barbital
6. Pipetear en un tubo 0.2 ml de plasma diluido (hacerlo por duplicado        )
7. Incubar a 37 grados C por 30 segundos
8. Agregar 0.2 ml de multifibren y simultáneamente accionar el cronómetro
9. Resbalando el contenido por la pared del tubo. Medir el tiempo enque tardan en formarse los primeros hilos de fibrina
10. El tiempo obtenido se transforma en concentración de fibrinógeno.

Curva de referencia

La curva de referencia para la determinación cuantitativa del fibrinógeno, se construye a partir de un plasma control concentración conocida que se diluye con buffer de barbital, de la manera como se presenta en la siguiente tabla, para luego determinar el tiempo de aparición del coágulo de fibrina en cada dilución.

Valores normales:

Normal 150 a 350 mg/dL

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