Producción microbiológica de ácido pirúvico
Enviado por Gmcaao01 • 2 de Noviembre de 2017 • Informes • 1.191 Palabras (5 Páginas) • 188 Visitas
Producción microbiológica de ácido pirúvico
Resumen
Se sintetizó ácido pirúvico por vía de la glucólisis a partir de soluciones de glucosa con diferente concentración, por medio de biotecnología usando levadura con variedad de nutriente la cual estaba inoculada en dos medios diferentes uno más básico (serie A) y otro ligeramente ácido (serie B), se trabajando en un medio alcalino con el fin de inactivar la enzima piruvato descarboxilasa. Se realizó la identificación de piruvato con dos tipos de análisis cualitativos en los cuales se observaron una formación de un anillo purpura (reacción con nitroprusiato de sodio) y una pequeña formación de precipitado rojo (2,4 dinitrofenil-hidracina).
Palabras clave: Acido pirúvico, Piruvato, Piruvato Descarxilasa. Glucosa, Levadura, Fermentación, Pruebas Cualitativas, Reacción, Enzima.
- Introducción
La glucólisis es una vía catabólica mediante la cual se da la formación del piruvato como resultado de la degradación de la glucosa en este compuesto 1. Si las condiciones son aerobias se produciría una oxidación completa, degradándose hasta CO2, y si la condición es anaeróbica puede seguir una fermentación que produce etanol, lactato, entre otros2.
El ácido pirúvico o piruvato es liquido incoloro de olor fuerte, de gran importancia a nivel industrial, farmacéutico, químico entre otros, ya que a partir de él, se pueden producir gran variedad de compuestos de acuerdo a microorganismos específicos para cada fermentación y las condiciones del medio3,4.
Algunos productos que pueden ser formados a partir del piruvato se muestran en la figura 1.
[pic 1]
Figura 1. Algunos productos que se pueden formar a partir del piruvato3.
La levadura Saccharomyces cereviciae es capaz de llevar a cabo la fermentación alcohólica en donde se obtiene como producto el etanol y CO2 por transformación cuantitativa5, 6.
Para ello se debe trabajar en condiciones alcalinas para logra la producción de piruvato al inhibir la piruvato descarboxilasa 6.
El ácido pirúvico también se puede obtener mediante el calentamiento de ácido tartárico y sulfatoácido de potasio o por la hidrólisis de cianuro de etanoilo2.
La prueba de nitroprusiato de sodio dan muestras positivas a moléculas isobutilmetilcetonas y en general todo grupo que pueda enolizar, se ve favorecida en medio alcalino con nitroprusiato de sodio dando un intenso color rojo que cambia a violeta al acidificar. Los hidrógenos de los átomos de carbono contiguos al grupo carbonilo son relativamente ácidos y pueden ser capturados con bases adecuadas. 7 Esto se puede observar en la siguiente reacción.
[pic 2]
Figura 2. Reacción de la prueba con nitroprusiato de sodio. 7
El 2,4-dinitrofenil-hidracina se utiliza en la práctica para detectar cualitativamente los grupos carbonilo de cetonas y aldehídos. Los carbonilos reaccionan con 2,4- dinitrofenil-hidracina formando un precipitado de fenilhidrazonas. Si el producto cristalino es amarillo, esto indica un compuesto carbonilo saturado, si se obtiene un precipitado anaranjado indica una cetona o aldehído aromático, si se obtiene precipitado rojo indica un sistema alfa (α), beta (β). 7
La reacción de la prueba se muestra a continuación (figura 4):
[pic 3]
Figura 4. Reacción de la prueba con el 2,4 dinitrofenil-hidracina. 7
- Discusión de Resultados.
Inicialmente las pruebas debieron de dar positivo en función a la concentración de glucosa, una mayor concentración de glucosa (respectivamente la disolución con 2% de glucosa) debió por lo tanto, generar una mayor producción de piruvato.
Se puede observar en los cuadros 1 y 2, respectivamente la serie utilizando Na2HPO4 y KH2PO4 como nutrientes, que la prueba con nitroprusiato de sodio dio afirmativa para las dos series, pero, no se dio una diferencia notoria a simple vista entre la seria A (1) y la B (2), sin embargo se esperaba una mejor respuesta en la seria A, ya que propiciaba un medio más básico o alcalino para inactivar o inhibir una mayor cantidad de la enzima de piruvato descarboxilasa, como resultado se obtendría una mayor intensidad color (verde o azul) y una sobresaliente formación del anillo.
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