Programa Genetica Molecular

Ingeniería en Biotecnología

Programa para el curso de Genética Molecular

Objetivos del curso:

Al terminar el curso, el alumno será capaz de:

1. Explicar qué son las enzimas de restricción, usos y los tipos de extremos que pueden

generar.

2. Analizar una secuencia de DNA buscando sitios de restricción para diferentes

enzimas, prediciendo el patrón electroforético a obtener.

3. Distinguir entre vectores de clonación, vectores de expresión y vectores para evaluar

la actividad de promotores.

4. Explicar la estructura y funcionamiento de diferentes vectores.

5. Manejar al menos un programa informático para anotar secuencias de DNA.

6. Identificar genes en un secuencia de DNA y seleccionar las enzimas de restricción

adecuadas para extraerlo y clonarlo.

7. Seleccionar las enzimas adecuadas para clonar un fragmento de interés en la

orientación deseada, en diferentes tipos de vectores.

8. Identificar y etiquetar un fragmento clonado, distinguiéndolo del resto de la

molécula, dentro de un vector.

9. Analizar patrones de restricción en geles de agarosa, para identificar construcciones

genéticas artificiales.

PONDERACIÓN DEL CURSO: (a criterio del profesor, a continuación se da un ejemplo)

- Exámenes parciales 45%

- Prácticas de laboratorio 20%

- Proyectos 20%

- Participaciones 10%

- Asistencia 5%

INSTRUCCIONES PARA EL PROFESOR:

- En cada sesión, brevemente mostrar el temario al grupo y ubicarlo en el contexto del

programa.

- Señalar claramente los objetivos a alcanzar en la sesión.

- Hacer un cierre de clase.

- Para las prácticas de laboratorio, se recomienda dedicar al menos una hora, en una

sesión previa a la práctica, para leer y revisar lo que se hará en el laboratorio. Una vez

realizada la práctica, organizar la entrega de reportes por equipo y dedicar una sesión

posterior a la práctica a la revisión de los resultados obtenidos, cuidando la adecuada

redacción del reporte, así como de sus diferentes secciones.

CONTENIDO:

1. Cómo clonar un Gen.

a. La tecnología del DNA recombinante y la biotecnología moderna

b. Clonación ¿qué significa?

c. Clonación en biología molecular: procedimiento general

d. PCR y clonación

2. Cortando y uniendo el DNA

a. Enzimas de restricción

i. Clasificación

ii. Tipos de extremos generados por las enzimas de restricción

b. Ligación

c. Dobles digestiones

i. Actividad estrella

ii. Isoesquizómeros

d. Modificación de los extremos generados por restricción

3. Vectores de clonación

a. Vectores de expresión, de clonación general, de evaluación de promotores.

Estructura y funcionamiento.

b. Vectores plasmídicos

i. TA-cloning

ii. TOPO-TA-cloning vs CloneJET

iii. pGL3

iv. pMIB

c. Programas bioinformáticos de apoyo

i. Vector NTI

ii. Plasma DNA

iii. CLC Sequence Viewer

iv. ApE plasmid editor

4. Sistemas receptores de construcciones genéticas, relación entre tipo de construcción y

sistema receptor.

5. Transformación bacteriana.

a) Bacterias quimiocompetentes y electrocompetentes.

6. Sistemas de expresión.

a. Expresión en bacterias de genes clonados

b. Expresión en células eucariotas de genes clonados

i. Levadura

ii. Baculovirus

iii. Células de mamífero

PRÁCTICAS DE LABORATORIO

Práctica 1: Extracción de DNA plasmídico.

Práctica 2: Análisis de restricción.

Práctica 3:

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