Prueba de patogenicidad con Phytophthora sp., en papa.

UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR[pic 1][pic 2]

FACULTAD DE CIENCIAS AGRÍCOLAS

 CARRERA DE INGENIERÍA AGRONÓMICA

CATEDRA DE FITOPATOLOGIA GENERAL

Guía de práctica de laboratorio N° 7

Título: Prueba de patogenicidad con Phytophthora sp., en papa. 

Objetivo: Adiestrar al estudiante en la técnica de inoculación de Phytophthora sp.

Materiales

• Foliolos de papa infectados con Phytophthora sp.
• Planta de papa  sana, de  a 4 semanas.
• Bisturí
• Papel toalla
• Agua destilada
• Recipiente plástico rectangular
• Vasos de precipitación, esterilizados

Procedimiento

1. Recoger en el campo foliolos infectados con Phytophthora sp., de plantas de papa.

2.- Colocar en el fondo del recipiente plástico, pedazos de  papel toalla humedecido con agua destilada esterilizada. Es una cámara húmeda para el desarrollo de micelio.

4.- Luego poner sobre 3-4  cm de alto un pedazo de  malla de alambre.

5.- Colocar sobre la malla, con el envés hacia arriba, de 6 a 8 foliolos previamente lavados con agua de grifo. Cerrar el recipiente y mantener en un lugar frío, 24 hasta 48 horas hasta que desarrolle micelio blanco.

6. Un día antes de la inoculación, colocar una funda de plástico sobre la planta de papa a inocular para que haya humedad suficiente y la infección prospere.

7.- A las  24 horas  de la cámara húmeda, aparece  micelio  blanco del patógeno sobre los foliolos.

8.- Recortar los pedazos de hoja de papa con el micelio blanco y esparcir  en 30-40 ml de agua destilada esterilizada.

8.- Refrigerar el inóculo a 5 °C durante 30 a 60 minutos.

9.- Retirar la funda e inocular con la suspensión de zoósporas las hojas de la planta sana.

10.- Cubrir  la planta inoculada con la funda de plástico durante 2 a 3 días y observar los síntomas.

RESULTADOS:

En las hojas de la planta inoculada observar el micelio blanco que aparece sobre el tejido verde que bordea a las lesiones  húmedas. Realizar una placa mediante la técnica de impronta y verificar la morfología de Phytophthora sp.

Evaluación

Los alumnos (as) presentarán a la docente, la planta inoculada y se calificará el resultado positivo de la inoculación.

NOTAS

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