TECNICAS DE HISTOLOGIA

TECNICA HISTOLOGICA

Procedimientos que hacen posible obtener muestras de tejidos y órganos para elaborar preparaciones histológicas de buena calidad.

Biopsia: intervención quirúrgica, extrae in vivo fragmento de tejido para análisis macro o microscópico puede ser por sacabocado punción y absorción, raspado,, trepanación, incisional o parcial, exicional o total.

Piezas quirúrgicas: extirpación de un órgano o gran parte del mismo por intervención quirúrgica.

Autopsia o necropsia: examen de órganos o tejidos después de la muerte para determinar sus causas.

Raspado: raer superficialmente un tejido. Para diagnosticar tipos de micosis.

Citología: material o muestras extraídas para estudio del contenido celular de líquidos.

Muestra en fresco: transoperatoria de diferentes tipos de tejido.

Manejo adecuado: muestra tamaño suficiente no mayor de 0.5cm de cada lado, orientación en forma de cuña abarcando tejido sano y dañado, lavado suave y cuidadoso, frascos separados e identificados, volumen muestra-fijador (1-20).

FIJACION

Procedimiento que se utiliza para conservar estabilizar y mantener la estructura de células y tejidos e impedir modificaciones post-mortem. Mantiene su estructura morfológica sin que sufra cambios notables y hacerlos viables para su observación además permite que los tejidos permanezcan sin cambios luego de subsecuentes tratamientos.

Actividad realizada por agentes físicos y químicos llamados fijadores, el más comúnmente utilizado conocido como formol al 10%.

ACLARACION

deshidratación; proceso realizado con alcoholes de menor a mayor concentración del 70% a alcohol absoluto.

aclaramiento o diafnizacion: proceso por el cual el tejido se torna transparente con el fin de quitar los pigmentos naturales que puedan intervenir en el estudio de nuestra muestra, la substancia comúnmente utilizada para este paso es el xileno o xilol.

Infiltración: se logra infiltrar la parafina liquida a cualquier medio de inclusión en estado líquido al tejido el cual disuelve el medio de aclaramiento y penetra en el tejido.

INCLUSION

Los tejidos fijados adquieren cierta consistencia y dureza, pero no la suficiente para que se puedan obtener secciones delgadas; por ello los tejidos tienen que ser incluidos y envueltos en una sustancia de consistencia firme. Las sustancias usadas solubles en agua: gelatina carbowax, metacrilato de glicol. Sustancias solubles en solventes orgánicos: parafina, celoidina, resinas.

MICROTOMIA:

Las secciones delgadas se realizan con la ayuda de instrumentos mecánicos diseñados para que seccionen el bloque de parafina en cortes delgados y de grosor aproximado entre 3 a 5 micras. Realizados los cortes se recogen con un pincel y se introducen en un baño de flotación con agua a 45°-50°C y se extiende por medio del calor la parafina y el tejido.

COLORACION:

El propósito de una tinción es hacer fácilmente visibles las estructuras de los tejidos. Permite diferenciar los componentes celulares y matriz extracelular. Según el tipo de coloración que se escoja se podrán colorear los componentes que se requiere observar. La tinción más comúnmente utilizada es la tinción H y E. PARA VER ELEMENTOS MAS ESPECIFICOS SE UTILIZAN tricomica de masson, gomory, mallory, azul alciano, azul de tolouidina, orceina, etc.

MONTAJE: consiste en colorear encima del corte coloreado y diafanizado una gota de sustancia adherente diluida en xilol (resina natural) con refracción similar a la del vidrio y encima un cubreobjetos sin dejar aire. A continuación se deja evaporar el xilol y la resina adquiere solides suficiente colocando las laminillas en una platina caliente (45°-50°c) durante 24-48 horas y estarán listas para ser observadas cuantas veces se desee.

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