TIPOS DE MICROSCOPIOS

TIPOS DE MICROSCOPIOS

1. MICROSCOPIO DE LUZ POLARIZADA: Formado por Dos Prismas; uno Encima del condensador “Prisma Polarizador de Nicholl” y otro prisma encima del tubo óptico “Prisma Analizador de Nicholl”, entre ambos ángulos de 90° estos primas resaltan las estructuras birefrigerentes como el hueso, los tres tipos de cartílago (Hialino, Elástico y Fibroso), hialudonidaza, musculo estriado, esmalte dental.
2. MICROSCOPIO DE CONTRASTE DE FASE: Se utiliza para tejidos sin colorear las estructuras se observan por los distintos contrastes que se observan según la densidad óptica que tengan, así el citoplasma se ve claro y núcleo oscuro. En sus objetivos lleva la descripción PHACO (fase y contraste), tiene un condensador anular “Heine”, que hace que la luz llega a unas placas de retardación para hacer visible los contraste.
3. MICROSCOPIO DE LUZ ULTRAVIOLETA: No utiliza luz corriente, si no luz ultravioleta que son producidos en unas lámparas de mercurio a presión o arcos voltaicos tiene dos filtros(uno en el condensador que evita el paso de la luz corriente) y otro en el tubo óptico(que evita el paso de los rayos uv hacia los oculares y dañen el ojo del observador) la imagen se observa brillante sobre un fondo oscuro.
4. MICROSCOPIO DE INMUNOFLUORENCIA: También utiliza rayos Uv como fuente de luz, es un microscopio de alta resolución, que se utiliza en inmunología para observar tejido linfático, linfocitos, células plasmáticas,antígenos,anticuerpos, la imagen se ve de color fluorescente sobre un fondo oscuro.
5. MICROSCOPIO DE CAMPO OSCURO: Mal llamado Ultramicroscopio, no tiene gran resolución utiliza unos condensadores anulares, llamados parabólicos o paraboilicos o cardiode, que hace la luz llegue de forma tangencial a la muestra, las estructuras se ven brillantes sobre un fondo oscuro.
6. MICROSCOPIO DE DISECCIÓN: Tiene dos prismas en el tubo óptico llamados de pordo y Smith entre ellos un angulo de 15°, que torna a la imagen tridimensional (3D) no es de gran aumento el menor de 4x y el mayor de 80x. Se utiliza en Botanica y Entomologia (Estudios de Insectos).
7. MICROSCOPIO DE ENSEÑANZA Y PROYECCIÓN:  es el microscopio corriente, tiene adaptada una camara,para que la imagen sea recogida en una pantalla y se observada por varias personas.

PRINCIPIOS DE ANÁLISIS MICROSCÓPICO

¿QUÉ SON LOS CORTES?                                                                                                                                                                                 R.- Un corte son una pequeña rebanada de tejido, que está pegada aun portaobjeto, tenida y cubierta por un cubre objeto.

TÉCNICAS HISTOLÓGICAS

1. TÉCNICA DE DISECCIÓN: Para tejidos fácilmente disociables, como el muscular, se utiliza micro agentes histológicas, accionadas con un mecanismo micrométrico para separar los componentes estructurales del tejido y asi estudiarlo indivialmente.
2.  TÉCNICA AL BROCHAJE: Para tejidos fácilmente desprendible o secreciones, se utiliza más brochas histológicas para tomar la muestra y llevar al portaobjeto, se fija(disecación) y se manda al laboratorio. Una variante es el Cepillado se utiliza cepillos histológicos para tomar la muestra de estructuras ductales o tubulares, la que sella al portaobjeto fija por secación  y se manda al  laboratorio.
3. FROTIS EXTENDIDO O PELÍCULA: Para líquidos orgánicos (sangre, liquido del peritoneo, liquido del pericardio, liquido pleural, liquido encefalocraneal y secreciones liquidas). La técnica consiste en colocar una gota en el extremo de un portaobjeto y con la ayuda de otro portaobjeto inclinado en 30° a 45° se realiza el extendido de “de un solo trazo”.
4. TÉCNICA DE DESCALCIFICACIÓN: Para tejidos duros como el Hueso o el Diente, los cuales son sometidos a sustancias acidas, durante 1 semana, cada 24 horas hay que remover, al terminar el tejido está completamente descalcificado y se lo procesa como a cualquier tejido blando, con esta técnica observamos la parte Orgánica del Tejido.[pic 1]

Hcl 8cc                                                                                                                                                                                                        Ácido Nítrico             Solución Acida al 12% (88% agua)                                                                                       Agua CSP 100cc  

1. TÉCNICA DE DESGASTE: También para tejido duro (hueso y diente), el cual consiste en desgastar o raspar el tejido hasta obtener una laminilla tan delgada que sea translucida, con esta técnica se observa la parte Inorganica del Tejido.
2. EXAMEN DE CÉLULAS VIVAS: a la muestra se añade nutrientes o solución fisiológica % 9 x 1000 o 0.9% para que las células no mueran rápidamente es útil para hacer el Espermiograma. Se tiene que calentar la platina al 37°
3. CONGELACIÓN: La muestra tiene que estar congelada en el criostato, tiene la ventaja de ser rápida es útil en biopsia intraoperatoria o para congelar grasa.
4. POST-FIJACIÓN: tenemos

1. Técnica de Difusión en Parafina
2. Técnica de Celoiclina (Tetranito de o Trinito de Celulosa)

MICROTOMO O MICROTONOS

          Aparato para hacer cortes histológicos el grosor más adecuado es de 3 a 5 y de 8 a 30um.

      PARTES DE UN MICRÓTOMO:

1. PORTA CUCHILLA: Superficie acanalada que recibe y asegura el borde posterior de la cuchilla (no cortante), tiene tornillos para asegurar e inclinar, fijar, en algunos micrótomos responde al mecanismo de movimiento.
2. PORTA BLOQUES: es una pequeña prensa metálica destinada a sujetar el taco de madera o plástico, donde está pegado al bloque de parafina que tiene incluido al tejido. Tiene un tornillo de Acenso y Descenso para acomodar el bloque y otro para graduar el grosor del porte, en algunos micrótomos responde al mecanismo de movimiento.
3. SISTEMA MECÁNICO DE MOVIMIENTO: es un sistema en base a poleas y carriles que en algunos micrótomos acciona al porta bloque o en otros al porta cuchilla.

TIPOS DE MICROTOMOS

1. MICRÓTOMO DE DESLIZAMIENTO: es este caso el esquema de deslizamiento acciona al porta cuchilla(cuchilla móvil) siendo el porta bloque fijo.
2. MICRÓTOMO DE PARAFINA O MINOT: aquí el sistema de deslizamiento acciona al porta bloque (bloque móvil) siendo el porta cuchillo fijo.
3. CRIO MICRÓTOMO O MICRÓTOMO DE CONGELACIÓN: está dentro del criostatum es similar al de Minot utiliza cuchillas con borde filo de diamante para cortar el tejido congelado. Se utiliza en la técnica de Congelación.

COLORANTES

DEFINICIÓN: Un colorante es una sustancia química orgánica y compleja capaz de impartir color a un cuerpo, cuando está en contacto con el.

COLORACIÓN: Proceso mediante el cual un cuerpo toma el color mediante acción del colorante utilizando para la preparación del Colorante.

TEORÍAS DE LA COLORACIÓN

1. TEORIA QUÍMICA: La coloración se produce por la reacción de los radicales del colorante (Acido –Básico) con las moléculas de la sustancia teñida o cuerpo a teñir (acido-básico) de esta manera tendremos colorantes ácidos , básicos y neutros. La Sustancia de acuerdo con su afinidad tintorial podrán ser: Acidofilas, Basófilos y Neutrófilos. (Pag.21 y 22)
2. TEORÍA FÍSICA: La coloración se produciría por que las partículas del colorante se introducen en los espacios intermoleculares del cuerpo a teñir por un proceso de absorción y se quedan allí gracias a la fuerza de cohesión molecular.
3. TEORÍA FISICOQUÍMICA: Reúne ambos conceptos anteriores y es la más aceptable.

TIPOS DE COLORANTES

1. DIFUSAS: Son colorantes que tiñe a todas las estructuras por igual por eso no se utiliza en histología. ej. carmín, verde o azul.
2. SELECTIVAS:  Aquí los colorantes tienen cierta predilección por algún componente. Ej. Hematoxilina tiñe al Núcleo y la Eosina al Citoplasma.
3. ESPECÍFICAS: Aquí el grado de selectividad es mucho mayor. Ej. Sudan III o IV para las Grasas, Violeta de Crisilo los Corpúsculos de Bar, Azul Brillante de Crisilo para los Reticulocitos.

1. DIRECTAS: aquellas que se tiñen a un solo contacto. Ej Eosina, Azul de Metileno.
2. INDIRECTAS: aquellas que se necesitan de un facilitador o mordiente. Ej. Hematoxilina que necesita del agua amoniacal o Alumbre de Potasio para manifestar su Color.

1. PROGRESIVAS: Colorantes que tiñen gradualmente. Ej. Hematoxilina
2. REGRESIVAS: Son colorantes que, sobre colorante, luego se quita el exceso con alcohol o con descolorante se realiza el descolorando hasta que la tinción sea óptima para su observación. Ej. Azul de Metileno utilizado en la Bacteriología.

1. SIMPLES: Cuando se utiliza un solo colorante. Ej., Eosina o Azul de Metileno.
2. COMBINADAS: Cuando se utiliza dos o más colorantes. Ej. Eosinato, Azul de Metileno, Azul de Giemza, H y E o Tricromicos. Cuando se tiñen de varios colores se llaman Van Cromaticos.

1. ONTOCROMATICOS: Cuando un colorante tiñe un color y tiene del mismo color. Ej, Hematoxilina, Azul de Metileno ambos son Azules y tiñen de Azul , Eosina y Rojo ambos tiñen de Rojo.
2. METACROMATICAS: Cuando un Colorante tiene un color y tiñe de otro color. Ej. Tionina o Azul de Tolminina o Azul de Tolumidida, ambos son Azules pero tiñen de Rojo a  las Glucoproteinas.

1. COLORACIONES INTRAVITALES: Son  colorantes atóxicos (no toxicos) que se inyecta a un tejido vivo. Ej Verde Janos, Oro Coloidal, Hierro Coloidal, Rojo Neutro.
2. COLORACIONES SUPRA VITALES: Son atóxicos pero que actúan en cultivo el tejido muere, no por acción  del colorante si no por estar separado de su fuente de nutrición. Ej Verde Janos, Azul Tripano, Rojo Tripano, Hierro Coloidal, Oro Coloidal.
3. COLORACIÓN POST-FIJACIÓN: Son componentes que actúan sobre tejido ya fijado (muerto), H y E, Tricromicos, Giemsa.

TINCION PARA COMPONENTES CORPORALES

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