Tinción de Romanowsky, Descubriendo la morfología

Tinción de Romanowsky,
Descubriendo la morfología

Introducción

El frotis o extendido sanguíneo es un preparado delgado y transparente extendido entre dos placas, cubre y portaobjetos. Es una técnica que nos permite trabajar con líquidos orgánicos espesos como la sangre y a la vez con muestra corporales viscosas como exudados y secreciones. En el campo de la hematología, esta técnica nos permite evaluar las características citológicas de las células sanguíneas, determinar anormalidades en cuanto a tamaño, color, forma e inclusiones citoplasmáticas, permitiendo establecer medidas cualitativas y cuantitativas; es también importante en el ámbito microbiológico para el diagnóstico de enfermedades por parásitos de la sangre como la malaria o tripanosomiasis americana y africana, respectivamente. Este preparado entrega valiosa información en casos como las leucemias, deficiencias de hierro, trastornos genéticos de la forma de los eritrocitos o posibles deficiencias de vitamina B12.

Las tinciones hematológicas tradicionales, o clásicas, se siguen empleando en la actualidad. Están basadas en la técnica desarrollada por Dimitri Romanowsky, quien ideó la combinación de colorantes básicos y ácidos para obtener una amplia gama de colores en las células sanguíneas. Un colorante tipo Romanowsky está basado en el uso de una mezcla formada por un colorante ácido (eosina) y uno o varios colorantes básicos (azul de metileno, azur A, azur B y azur C). Las tinciones que se realizan con este tipo de colorante se denominan tinciones panópticas o tinciones tipo Romanowsky.

Dentro de las tinciones tipo Romanowsky encontramos:

• Tinción de Giemsa.
• Tinción de May-Grünwald-Giemsa. También llamado Panóptico de Pappenheim.
• Tinción de May-Grünwald.
• Tinción de Wright.

Esta separación por colores es el llamado efecto Romanowsky, que tiñe de púrpura a los núcleos y gránulos neutrofílicos y de color rosa a los eritrocitos. Los ácidos nucleicos, las proteínas y el citoplasma se tiñen de azul, delatando a los posibles parásitos. Esta tinción nos va a permitir distinguir la forma, tamaño y contorno de los hematíes, leucocitos y plaquetas y el núcleo, citoplasma y granulaciones de las distintas células ya que adquieren diferentes colores: azul, púrpura, rosa o salmón.

Objetivo

Conocer y entender cada uno de los pasos necesarios para realizar el frotis y saber las propiedades de la tinción de Romanowsky, seguidamente, observar al microscopio e identificar las distintas células sanguíneas.

Materiales

• Muestra de sangre
• Tubos de ensayo
• Tinción de May  Grünwald
• Tinción de Giemsa
• Agua destilada
• Portaobjetos
• Pipetas Pasteur con chupete.
• Gradilla
• Sanitas
• Microscopio
• Aceite de inmersión

Método

1. Obtener la muestra de sangre y depositarla en un tubo de ensayo con anticoagulante.
2. La gradilla va a sostener el tubo de ensayo
3. Con la pipeta se obtendrá 0.5 ml de sangre y se depositara en el porta objetos
4. Debajo del portaobjetos pondremos una sanita para evitar suciedad
5. Realizar el extendido de sangre de acuerdo a la técnica descrita por el instructor.
6. Dejar secar el extendido
7. Añadir el colorante de May Grünwald y se deja actuar por 8 minutos
8. Lavar con agua destilada y no retirar el exceso
9. Añadir el colorante de Giemsa mientras la muestra aun tenga el agua destilada y dejar actuar por 8 minutos más. Tiene que adquirir un verde brillante de lo contrario repetir la muestra
10. Retirar el colorante y dejarlo con agua destilada 3 minutos.
11. Lavar con agua corriente por la parte de atrás y dejar secar al aire.
12. Observar al microscopio con el objetivo de 100x usando aceite de inmersión, y se identificaran células sanguíneas.

Manejo de Residuos

Peligrosos Biológico Infecciosos

Identificación de los residuos.

Los desechos deben de ser identificados inmediatamente después del procedimiento que los generó, en el sitio donde se originaron y por el personal que los generó, esta práctica evita la reclasificación de los desechos, disminuyendo los riesgos para el personal encargado de la recolección de los residuos.

Para su correcta identificación y posterior envasado, la separación de los residuos se debe de realizar de acuerdo a su estado físico (líquido o sólido) y su tipo, como se indica a continuación:

Envasado de los Residuos Generados

Una vez que los residuos han sido identificados y separados de acuerdo al tipo y estado físico, estos deberán ser envasados de acuerdo a la tabla siguiente. La razón para usar diferentes recipientes para diferentes RPBI es porque distintos residuos tienen diferentes procesos en su disposición final:

Almacenamiento Temporal

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