Condiciones Termodinamicas

Tarea Microbiología “Medios de cultivo”

“Kligler Hierro Agar”

¿Qué es?

Es un medio específico para pruebas de identificación de Enterobacterias. Se trata de un medio diferencial que permite conocer el comportamiento del microorganismo ante dos azucares (Glucosa y lactosa), Identifica la formación de gas y comprueba si el microorganismo puede producir sulfatoferroso (FeSO4) a partir de tiosulfato sódico ( Na2(S2O3) )

Fundamento

En el medio de cultivo, la peptona de carne y la tripteína, aportan los nutrientes adecuados para el desarrollo bacteriano. La lactosa y la glucosa son hidratos de carbono fermentables. El tiosulfato de sodio es el sustrato necesario para la producción de acido sulfhídrico, el citrato de hierro y amonio, es la fuente de iones Fe+3, los cuales se combinan con el acido sulfhídrico y producen sulfuro de hierro, de color negro. El rojo de fenol (amarillo acido, rojo básico) es el indicador de pH, y el cloruro de sodio mantiene el balance osmótico. El agar es el agente solidificante.

Por fermentación de azucares, se producen ácidos, que se detectan por medio del indicador rojo de fenol, el cual se torna de color amarillo en el medio acido. El tiosulfato de sodio se reduce a (H2S) sulfuro de hidrogeno el cual reacciona luego con una sal de hierro proporcionando el conocido sulfuro de hierro de color negro

Datos:

Es un medio de cultivo diferencial, ya que permite conocer el comportamiento de las Enterobacterias ante la fermentación de dos azucares como son la glucosa y la lactosa, lo cual genera como producto un acido que detecta el medio por el indicador rojo de fenol. Y posteriormente el tiosulfato de sodio se reduce a H2S el cual reacciona con una sal de hierro para llegar a un producto final que es el sulfuro de hierro.

Es diferencial debido a que establece diferencias metabólicas entre los grupos microbianos que crecen en conjunto. Esto es porque contiene compuestos que permiten observar cambios de coloración tras una reacción metabólica que puede identificar el producto final ya sea un acido o una sal alcalina.

Componente (Gramos x Litro) Función en el medio

Peptona de carne 13 g Fuente de nitrógeno

Cloruro de sodio 5 g Oligoelementos

Lactosa 10 g Fuente de carbono

Tripteina 10 g Fuente de nitrógeno y fosfatos.

Glucosa 1 g Fuente de carbono

Citrato de hierro y amonio 0.5 g Oligoelementos y bioelemento secundario

Tiosulfato de sodio 0.3 g Oligoelemento

Rojo de fenol 0.025 g Indicador de pH

Agar 15 g Factor de agarosa o agaropectina que permite la solidificación del cultivo

pH final = 7.3 +- 0.2 Escala de pH

Preparación:

Se suspenden 54.8 gramos del polvo por litro de agua destilada. Mezclar bien y calentar con agitación frecuente, hervir 1 o 2 minutos hasta disolver de manera total. Llenar hasta la tercera parte los tubos de ensaye. Esterilizar a 121 grados Celsius por 15 min. Enfriar en pico de flauta profundo.

Bibliography

• Agar, K. H. (04 de 05 de 2012). Agar hierro. Recuperado el 05 de 02 de 2014, de http://www.britanialab.com/productos/565_hoja_tecnica_es.pdf

• Britania. (05 de 05 de 2010). Kliger Hierro Agar. Recuperado el 05 de 02 de 2014, de Hagar hierro: http://britanialab.com.ar/esp/productos/b02/kliglerhierroagar.htm

• Cultivos. (02 de 04 de 2010). Agar hierro. Recuperado el 05 de 02 de 2014, de file:///F:/QFB/Cuarto%20semestre/microbiologia/Microbiologia%20Teoria/medios%20de%20cultivo/medios%20de%20cultivo.htm

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