IDENTIFICACIÓN DE AMINOÁCIDOS Y PROTEÍNAS

RESULTADOS

A) Reacciones de coloración

• Reacción de Biuret

Al adicionar la solución de biuret a la albumina diluida se observa que esta prueba es positiva, progresivamente aparece una solución color azulina.

• Reacción xantoproteica

Al adicionar acido nítrico a la solución con albumina y calentar, se observa que lentamente aparece una coloración amarilla. Una vez que se enfrió se adiciono el hidróxido de amonio y esta solución se forma una suspensión color naranja.

• Reacción de la ninhidrina

Al adicionar la ninhidrina se hace calentar por unos minutos hasta que apareció una solución color purpura. Una vez que apareció el color se le adiciono acido acético y cloroformo generando una solución de 2 faces donde la parte inferior toma una coloración naranja.

B) Reacciones de precipitación

Homocistinuria

Caracterizada por el aumento de homocistina en el

organismo. Los síntomas se manifiestan tras el

nacimiento, uno de los más frecuentes es la dislocación

de la lente ocular. También, se presentan

anormalidades mentales y en su conjunto los diferentes

daños asociados a este tipo de trastorno conducen a la

muerte. La aminoacidura observada en este trastorno

es del tipo de desbordamiento.

Albinismo

Se debe a la ausencia de la enzima tirosinasa que

permite el paso de tirosina a melanina. Induce una

aminoacidura de desbordamiento. [9]

III.- IDENTIFICACIÓN DE AMINOÁCIDOS Y

PROTEÍNAS

à Reacción de Ninhidrina

Reacción para la detección de aminoácidos,

actualmente acoplada a sistemas de valoración

automática Tiene como objetivo detectar y cuantificar

cantidades de aminoácidos libres. Los aminoácidos, en

general reaccionan con la ninhidrina cuando son

calentados con un exceso de la misma. Todos los

aminoácidos que poseen un grupo amino libre

reaccionan y forman dióxido de carbono, amoníaco y

un aldehído que contiene un átomo de carbono menos

que el compuesto original. Esta reacción da lugar a la

formación de un producto color azul o púrpura (que

posteriormente puede ser utilizado para cuantificar el

aminoácido). En el caso de la prolina, que

estructuralmente no posee el grupo amino libre, sino

un grupo imino, la coloración final es amarilla. El

amoníaco, la mayoría de los polipéptidos y las

proteínas pueden desarrollar coloración en esta

reacción, pero a diferencia de los aminoácidos, no

liberan CO2. La coloración azulada o violeta será

proporcional a la concentración del aminoácido.

La ninhidrina (hidrato de tricetohidrindeno) es un

oxidante energético que por una desaminación

oxidativa de los aminoácidos conduce a la formación

del aldehído correspondiente, con liberación de

amoniaco y gas carbónico y formación de la ninhidrina

reducida o hidrindrantina. La molécula de hidridantina,

en presencia de otra de ninhidrina, condensa a través

del amoniaco produciendo una estructura denominada

indanona o púrpura de Ruhemann, manifestando un

color rojizo, excepto para la prolina, hidroxiprolina y

en menor medida para la histidina. Presenta su máximo

de absorbancia a los 570 nm, exceptuando los tres

aminoácidos reseñados anteriormente.

à Reacción de Biuret

El nombre de la reacción procede del compuesto

coloreado formado por la condensación de dos

moléculas de urea con eliminación de amoníaco. Esta

reacción está dada por aquellas sustancias cuyas

moléculas

...