TÉCNICAS CUANTITATIVAS DE FLAVONOIDES

TÉCNICAS CUANTITATIVAS DE FLAVONOIDES

Principales metodología para la determinación de flavonoides totales

La mayoría de los métodos analíticos utilizados para la determinación cuantitativa de flavonoides se han basado en reacciones colorimétrica, empleando en principio fotómetros sencillos y adaptando posteriormente las técnicas a espectrofotómetros, junto con esto, son muy pocos los métodos basados en medidas de los cambios de absorbancia fuera de la región del visible.

Las principales técnicas de determinación flavonoides totales pueden clasificarse de este modo:

Determinación de flavonoides totales con reactivos alcalinos

Se determinó flavonoides totales expresados como hesperidina, a partir de material fresco o zumo de naranjas, empleando como extractivos agua y alcohol; tratando el extracto con dietilenglicol en presencia de NaOH 4N, produciéndose una reacción coloreada y leyendo su absorbancia a 420 nm.

Determinaron flavonoides totales expresados como hesperidina en cortezas de Citrus. Realizan la extracción con metanol, a partir de material seco y molido, llevando el extracto a sequedad, disolviéndolo en piridina-metanol, 1:1 y determinan la concentración del extracto por reacción de éste con NaOH 1N en metanol-agua 1:1, dejando desarrollar el color durante hora y media. La curva patrón la establecen con hesperidinas en metanol-piridina 1:1, con concentraciones de 500 a 2500 gr/100ml. (5-25 ppm). La lectura espectrofotométrica la realizan a 370 nm, longitud de onda donde aparece el máximo de absorción.

Determinación de flavonoides totales en medio ácido

Determinan flavonoides totales en zumos naturales o en extractos de pulpa en medio ácido, (pH 3,8), tras tratar el zumo o extracto con SO4Cu y aireación durante una hora, al bojeto de eliminar el ácio ascórbico presente y evitar su interferencia. Absorbancia de 300 y 290 nm, e interpolan el contenido de flavonoides totales por diferencia entre las dos lecturas. La curva patrón la realizan con un flavonoide típico del material a analizar. Con este método determinan flavonoides en zumo de uvas, expresando los resultados en naringina, y flavonoides en zumo y extracto de pulpa de naranja, expresando los resultados en hesperidina.

Determinación de flavonoides totales con reactivos metálicos

Determinana flavonas y flavonoles totales a partir de extractos vegetales, empleando Cl3Al como agente quelante en medio etanólico: el contenido de flavonoles totales lo refieren a quercetina. Realizan dos curvas, una en etanol y la denominan de referencia y la otra en Cl3Al disuelto en etanol y la llaman de medida. Para cada curva realizan dos lecturas espectrofotométricas, a 435 nm,. Flavonoles y a 390 nm.,

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