Acidos nucleicos Practica de laboratorio

I N D I C E

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Índice ………………………………………………………………………………………   1

Normas de seguridad que deben seguirse en un laboratorio ………………………………   2

Material   básico   de    laboratorio   de bioquímica su reconocimiento y empleo ………..    4

Preparación de soluciones con  unidades físicas de concentración ………………………..   8

Preparación de soluciones con  unidades químicas de concentración ……………………..   12

Ejercicios de preparación de soluciones ……………………………………………………  14

Determinación    del    efecto    de   la   concentración   del  sustrato sobre la actividad enzimática ………………………………………………………………………………….. 17

Ejercicios de termodinámica ……………………………………………………………….. 23

Reacciones generales de carbohidratos …………………………………………………….  27

Determinación  cuantitativa de  los   azúcares reductores por el metodo de Lane-Eynon (Fehling modificado) ………………………………...........................................................    34

Colorimetría nociones generales ……………………….……………………...…………… 38

Determinación de glucosa en sangre total ………………………………………………….  42

Determinación cualitativa de aminoácidos y proteínas …………...……………………….   46

Identificación de aminoácidos por cromatografía sobre papel ………………..……………  53

Digestión de proteínas ……………………………………………………………….……..  57

UNIVERSIDAD NACIONAL EXPERIMENTAL “RÓMULO GALLEGOS”

NÚCLEO ZARAZA

ÁREA DE MEDICINA VETERINARIA

ASIGNATURA: Bioquímica

NORMAS DE SEGURIDAD QUE DEBEN SEGUIRSE EN UN LABORATORIO

(DOCENCIA – INVESTIGACIÓN)

1. Los equipos y materiales de laboratorio deben ser manipulados con el debido cuidado (siguiendo las pautas de los manuales).

1.       Nunca trabaje solo en el laboratorio o si alguien no está enterado de su presencia en el mismo.

1.       No realice experimentos NO AUTORIZADOS.

1.       Infórmese de la ubicación del extinguidor de incendios, de la ducha de seguridad y del gabinete de primeros auxilios.

1.       Es imprescindible tener en el laboratorio manual o instructivo que indiquen que debe hacerse en el caso de que algún reactivo químico entre en contacto con los ojos, la piel, la boca o las vías respiratorias.

1.       Esté consciente de los peligros involucrados en el manejo de aparatos eléctricos.  Todo aparato eléctrico debe estar debidamente conectado a tierra.

1.       No fume en el laboratorio.

1.       Todos los cilindros de gases comprimidos deben ser sujetados por una cadena en forma segura.  Además, deben transportarse utilizando un vehículo apropiado.

1.       Use pantalla de seguridad cuando existe el peligro de explosión de aparatos de vidrio.

1. En el laboratorio, mantenga protegido los ojos en todo momento (si es posible, con lentes de seguridad).  El uso de lentes de contacto, aún que se mantengan debajo de los lentes de seguridad, está completamente prohibido.

1. No pruebe el gusto de ningún reactivo químico en el laboratorio.  No use el laboratorio como sitio para comer ni ingerir alimentos, bebidas; utilizando material de vidrio del laboratorio.

1. Evite respirar humo o emanaciones gaseosas de cualquier tipo.  Cuando se produzcan gases, durante la realización de un experimento, este se debe llevar a cabo bajo la campana de extracción de gases.

1. No llene las pipetas con reactivos químicos por succionamiento con la boca.  Use bulbos de succión.      

1. No introduzca sin lubricación, tubos de vidrio a través de los tapones de goma.  Al insertar dichos tubos dentro del tapón debe proteger sus manos con un paño (preferiblemente de tela).  Durante esta operación, mantenga sus manos lo más cerca posible una de la otra.

1. El uso de una bata de laboratorio es esencial cuando se usa ropa fácilmente combustible. Además proporciona una protección adecuada cuando se trabaja con reactivos químicos.  El calzado que se utiliza debe ser lo suficientemente protegido.

1. Aquellas personas que usen el cabello largo, deben mantenerlo recogido cuando trabajen en el laboratorio (el cabello es un material fácilmente combustible).

1. Para preparar soluciones diluidas de ácidos, a partir de soluciones muy concentradas deben verterse cuidadosamente el ácido sobre el agua, (nunca debe realizarse el proceso inverso) manteniendo agitación constante.

1. Si soluciones concentradas de ácidos llegan a entrar en contacto con la piel, nunca lave de inmediato la parte afectada con agua corriente. Lo primero que debe hacerse es eliminar todo el ácido posible utilizando toallas de papel  absorbente o tela y luego lavar la parte afectada con agua corriente por espacio de 10 – 15 minutos.

1. Todas las personas que trabajen en el laboratorio deben mantener la calma en caso de ocurrir un accidente en el mismo.  Sepa lo que usted haría especialmente en el caso de desmayos, quemaduras o heridas producto de dichos accidentes.

UNIVERSIDAD NACIONAL EXPERIMENTAL “RÓMULO GALLEGOS”

NÚCLEO ZARAZA

ÁREA DE MEDICINA VETERINARIA

ASIGNATURA: Bioquímica

ACTIVIDAD PRÁCTICA  N° 1

MATERIAL BÁSICO DE LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

RECONOCIMIENTO Y EMPLEO

        La bioquímica es una ciencia experimental, en la que se hace constante la aplicación de experiencias, enunciados, leyes, y conocimientos de ciencias básicas como son la química, matemáticas, física y biología; por lo cual el estudiante debe enfrentarse a un laboratorio de química, en el cual deberá llevar a cabo las experiencias prácticas, para lograr los objetivos de la materia.

        Debido a lo anterior expuesto, el primer contacto práctico será con el material de vidrio, el cuál utilizará permanentemente en el laboratorio de bioquímica, por lo tanto se hace indispensable que el estudiante se familiarice, conozca, domine su uso y cuidado.

MATERIAL DE LABORATORIO

1. VASO DE PRECIPITADO Ó BEAKER: es un recipiente de vidrio, cuya capacidad varía entre los 5 y 3.000 ml.  Se utiliza para contener, calentar y recoger líquidos, además de efectuar precipitación, titulación, etc.

1. CILINDRO GRADUADO Ó PROBETA GRADUADA: es un cilindro de vidrio con una base generalmente hexagonal, que lo mantiene vertical.  Los más utilizados son de 10, 25, 50, 100, 250, 500, 1.000 y 2.000 ml de capacidad.  Se utiliza para mediciones rápidas de líquidos que no requieran de gran precisión.

1. MATRAZ: es un equipo de vidrio redondeados y de base plana.  Se utilizan para preparar soluciones, no son recomendables para calentar líquidos.  Su capacidad varía entre los 25 y 2.000 ml.  

   Existen los matraces aforados, que presentan un cuello largo y estrecho que permite realizar lecturas exactas del líquido contenido en él, ya que tienen un aforo (marca en el cuello).  Presentan tapa esmerilada.  Se usan para preparar y contener cantidad exacta de soluciones, no para medir soluciones.  

1.  ERLENMEYER o FIOLA: recipiente de vidrio con forma cónica. Se utiliza para calentar líquidos, preparar soluciones, titulaciones, etc.  Su capacidad varía entre 10 y 1.000 ml.

1. BURETA: son tubos de vidrio, graduados en milímetros (décimas, centésimas), las hay también de divisiones menores (micro-buretas).  En la parte inferior presentan una llave esmerilada y cónica.  Esta llave debe manipularse con la mano izquierda, con la otra mano se sostiene la varilla de vidrio o recipiente para agitar el líquido que se vierte de la bureta.  Se utilizan para mediciones exactas de líquido (titulaciones).

1. PIPETAS: son tubos de vidrio.  Pueden ser aforadas y graduadas.  Se utilizan exclusivamente para medir volúmenes de líquidos que van a ser trasvasados.  

   Las PIPETAS AFORADAS (VOLUMÉTRICAS), pueden tener uno o dos aforos, las que presentan un aforo sirven para medir líquidos desde el aforo hasta la parte inferior y las que tienen dos aforos, miden volumen de líquidos desde el aforo superior hasta el superior.

   Las PIPETAS GRADUADAS, tienen divisiones menores entre los extremos, que puede ser en décimas, centésimas y milésimas.  Existen dos clases de pipetas graduadas: las que miden volumen desde el 0 (cero) hasta el extremo inferior de la pipeta y las que miden volúmenes desde el cero hasta la última graduación antes del extremo inferior.

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