Análisis De Cultivos Vegetales

Lo que se analizó en esta parte de la experimentación es el crecimiento de callos en medio

sólido. Para que se observara un crecimiento real de un callo se debió haber preparado el

medio de cultivo, que en este caso fue el medio MS (Murashige Skoog) , ya que este se

utiliza para provocar la desdiferenciación en plantas , también en el medio de cultivo se

encuentran las sustancias necesarias para el crecimiento y desarrollo de los tejidos

vegetales como sales minerales que deben aportar los elementos esenciales como

Macronutrientes (N, P, K, S. Ca y Mg) y Micronutrientes (Fe, B, Mn, Zn, Cu, Mo, y Co).

Normalmente es imprescindible una fuente de carbono, generalmente la sacarosa la cual

fue la que se utilizó en este caso , esto debido a que hay una escasa actividad

fotosintética en los tejido in vitro. Además, el medio puede ser enriquecido con

Aminoácidos, Vitaminas y Reguladores del Crecimiento (en este caso se empleo ANA y

BAP).

Se prepararon 150 mL del medio MS , pero este procedimiento debe tener ciertos

cuidados que son fundamentales para que el crecimiento fuera exitoso , uno de ellos es

haber ajustado el pH del medio de 5 -6.5 ya que este es un factor fisicoquímico que afecta

al cultivo de tejidos , por otra parte el pH después del proceso de esterilización puede

disminuir y ocasionar las siguientes complicaciones: Las hormonas se hacen menos

sensibles , el agente gelificante puede perder su rigidez, las vitaminas pueden hacerse

menos estables , entre otras que como la temperatura ideal para el crecimiento según la

bibliografía debe ser alrededor de 25 a 27

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C otro factor que es importante es haberlo

mantenido a una buena humedad que también se indica que es en un promedio de 30%

ya que si se eleva esta humedad puede inducir a una contaminación del medio y esto

afectaría el crecimiento del cultivo. En algunos medios de cultivo del equipo Avengers se

observaron contaminaciones, la humedad pudo ser un factor, el cual se debe de tener en

cuenta al realizar este tipo de cultivos.

Ya que el medio de la mayoría de los equipos no se observó ninguna contaminación del

medio se procedió a la elección del vegetal para poder extraer el explante el cual debía

tener ciertas características , como , debía ser una zanahoria joven que tuviera un color

naranja brilloso , no estuviera dañada con cortes, que estuviera firme, y que al hacer el

corte mostrara un cambium que fuera de tamaño considerable ya que de ahí

obtendríamos células meristematicas que estas nos dice que son tejidos embrionarios

capaces de diferenciarse o perpetuarse; es decir, se multiplican activamente para formar

los tejidos adultos diferenciados (crecimiento y especialización) y a su vez originan nuevas

células meristemáticas. , al ser joven tejido este podría soportar las condiciones del medio

de cultivo que busca estresar a las células meristematicas . Esto se llevó de igual manera

que en la elaboración del medio en condiciones asépticas con la desinfección del vegetal,

con Etanol al 70% e Hipoclorito de sodio al 10%, el agregar hipoclorito de sodio para

algunos equipos afecto ya que en principio se dejó el tiempo para agragar en 10 min. pero

algunas zanahorias no resistieron el tratamiento, esto pudo ser causado porque la

zanahoria no estaba en buenas condiciones ( no era joven ) o también que el cloro que se

utilizo estaba muy concentrado y se debió hacer otra solución con otras concentraciones

más bajas para que los explantes resistieran el tratamiento. Este punto es crítico ya que si se deja una cantidad de

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