Biologia Molecular
Enviado por loricita • 26 de Enero de 2014 • 531 Palabras (3 Páginas) • 203 Visitas
PRACTICA NO 2 EXTRACCION DE ADN
1. INTRODUCCION
Las características de un organismo están especificadas en su información
genética, la cual está representada como una secuencia de ácidos nucleicos,
donde la suma total de esta secuencia es lo que conforma su genoma.
Quizás de los procedimientos en biología molecular, el más básico es la
purificación de ácidos nucleicos, en la forma de ADN o ARN. Por lo tanto se
requieren métodos seguros para la separación de estos componentes de las
células. Para lograr esto, se utilizan diversos métodos de extracción dependiendo
del tipo de tejido a emplear, fresco, seco o congelado.
2. OBJETIVOS
· Identificar las etapas indispensables en los protocolos de extracción de
ADN
· Comparar varias técnicas de extracción de ADN
· Realizar un procedimiento modelo para la obtención de ADN
3. MARCO TEORICO
El primer paso en cualquier protocolo de separación es el rompimiento del material
inicial, ya sea de origen viral, bacteriano, vegetal o animal. El método utilizado
para romper la célula debe ser tan leve como sea posible con el fin de causar el
menor daño posible al ADN. La lisis celular se puede hacer por acción mecánica,
pulverizando el tejido con hielo seco o nitrógeno líquido, también se puede utilizar
la degradación enzimática de la pared celular (si está presente) y lisis con
detergentes de las membranas celulares. Seguido al rompimiento celular la
mayoría de métodos involucran una desproteinización, lo cual se lleva a cabo con
un solvente orgánico, seguido de una precipitación con isopropanol o etanol y
posterior solubilización con agua o tampón.
Existen diferentes técnicas para la extracción del ADN, aunque todas conservan el
uso de los mismos principios y fundamentos.
Para obtener ADN a partir de leucocitos totales (obtenidos de sangre periférica),
células en cultivo, tejidos animales, vegetales,
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