Concentración de hemoglobina en una muestra de sangre venosa

OBJETIVO

Determinar la concentración de hemoglobina en una muestra de sangre venosa.

INTRODUCCIÓN

El método que se utiliza para realizar la determinación de la concentración de hemoglobina se denomina método de cianometahemoglobina.

La hemoglobina es una heteroproteina de la sangre, de masa molecular 64000 g/mol. (64 kDa), de color rojo característico que transporta el oxígeno desde los órganos respiratorios hasta los tejido, el dióxido de carbono desde los tejidos hasta los pulmones que lo eliminan y también participan en la regulación de pH de la sangre, en vertebrados y algunos invertebrados.

Para realizar esta determinación se utiliza el reactivo Drabkin, que se compone de Na + Bicarbonato; cianuro de k (toxico que mata la inhibición de la respiración celular), y ferrocianuro de k (potasio).

MATERIAL Y EQUIPO

• Espectrofotómetro (540 nn)
• 2 tubos de ensaye
• Pipetas de shalí
• Puntas de pipetas
• Micropipetas
• Gradilla

MATERIAL BIOLOGICO

• Sangre venosa

REACTIVOS

• Drabkin
• Patrón de hemoglobina
• Agua destilada
• EDTA.

METODOLOGIA

• Tomar muestra de sangre venosa en un tubo con EDTA.

[pic 1]

• Poner en un tubo de ensaye 5ml de Drabkin y agregar .02ml de sangre con la pipeta shalí y enjuagar la pipeta.

[pic 2]

• Tapar y esperar 10 mn.

[pic 3]

• Limpiar el espectrofotómetro con agua destilada

[pic 4]

• Leer el patrón de cianometahemoglobina 80 mg/dL a 540 nn, después de leer el patrón se debe limpiar el espectrofotómetro con agua destilada.

[pic 5]

• Leer absorbancia de nuestra muestra en el espectrofotómetro a 540 nn.

[pic 6]

• Limpiar el espectrofotómetro con agua destilada.

[pic 7]

• Realizar las operaciones para determinar la concentración de hemoglobina.

[pic 8]

RESULTADOS

PATRON =  .450

PROBLEMA = .384

Factor = 80 mg/dL÷.450 = 177.7777778

Concentración de Hb = (.340)(177.7777778) = 68.2666668

Concentración = (80)(251)÷1000 = 20.080÷1000 = 20 g/dL

F = 20÷.450 = 44.4444444

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