Cromatografia De Liquidos
Enviado por 177587 • 21 de Abril de 2013 • 428 Palabras (2 Páginas) • 1.058 Visitas
ANALISIS INTRUMENTAL
TEMA III
CROMATOGRAFIA DE LIQUIDOS DE ALTA RESOLUCION (HPLC)
La cromatografía liquida de alto rendimiento o cromatografía liquida de alta resolución (HPLC de high performance liquid chromatography) representa una de las formas más usadas de la cromatografía en la actualidad.
El alto rendimiento se relaciona con la capacidad del HPLC para permitir separaciones muy selectivas, y en consecuencia de alta calidad, en un mínimo tiempo. Esta capacidad de separación se logra haciendo pasar una fase liquida móvil a través de un soporte estacionario finamente dividido a alta presión.
La HPLC se usa mas como técnica analítica de alta sensibilidad y selectividad para identificar y cuantificar analito en mezclas complejas.
En el caso normal de los analitos se disuelve en un disolvente o mezcla de solventes. Se escoge la ase móvil para permitir la separación más eficiente en un tiempo mínimo.
La muestra se inyecta en la fase móvil y pasa, a presión, por la columna mediante una bomba.
La separación se hace por partición de dos solutos entre la fase móvil y la fase estacionaria de la columna de HPLC.
Eficacia de la columna en la cromatografia de liquidos
Efecto del tamaño de particula del relleno
El coeficiente de transferencia de masa en la fase móvil C_M está relacionada directamente con el cuadrado del diámetro d_p de las partículas que constituyen el relleno. Como consecuencia de ello, la eficacia de una columna de HPLC debería mejorar espectacularmente cuando disminuye el tamaño de la particula.
Ensanchamiento de banda extracolumna en cromatografía de liqudos
En cromatografía de liquidos, tiene lugar a veces un ensanchamiento de banda significativo fuera del relleno de la columna propiamente dicho. El así llamado ensanchamiento de banda extra-columna tiene lugar cuando se transporta el soluto a través de tubos como los que se utilizan en los sistemas de inyección, en los detectores y en los tubos que conectan los distintos componentes del sistema. El ensanchamiento proviene de la diferencia de velocidad de flujo de las capas de liquido adyacentes a las paredes del tubo y del centro. Como consecuencia la parte central de una banda de soluto se mueve con mas rapidez que la periférica.
Instrumentos para la cromatografía de liquidos
Detectores para HPLC
Fotodiodos y detectores de absorción UV-visible
Los detectores de UV-visible son el tipo
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