Cuestionario Previo 4: Diálisis y Electroforesis

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Cuestionario Previo 4: Diálisis y Electroforesis

1. ¿Qué es la diálisis y cuál es su fundamento?

Se refiere a la separacion de sustancias que estan mezcladas en una mismsa disolucion la cual se basa en utilizar membranas semipermeables las cuales contienen poro de dimensiones mas pequeñas a las macromoleculares.

1. ¿Qué es la amilasa salival, que reacción cataliza y cuáles son sus condiciones óptimas de actividad? ¿Qué cofactores y/o activadores requiere?

Es una enzima la cual ayuda a digerir los carbohidratos y cataliza los enlaces α-1,4-glucosídicos de los almi- dones y los carbohidratos, tiene un pH óptimo entre 5.07.0 y no requiere calcio para su funcionamiento.

1. Investigar el fundamento de la reacción del lugol con el almidón.

La coloración producida por el Lugol se debe a que el yodo se introduce entre las espiras de la molécula de almidón lo cual nos indica que no es una reaccion quimica como tal sino que forma un compuesto que modifica las propiedades fisicas de esta molecula volviendolo azul-violeta.

1. ¿Qué es la electroforesis y cuál es su fundamento? ¿Qué influencia tiene el paso de la corriente (voltaje e intensidad), el amortiguador, la muestra y medio de soporte sobre el método de electroforesis?

Es una técnica de separación usada en las investigaciones de ADN y ARN, se basa en la movilización de las moléculas disueltas en una solución de electrolitos a través de un gel debido a la induccion de la corriente eléctrica, el paso de corriente afecta debido a que arrastra las particulas cargadas energeticamente, el amortiguador sir para 2 cosas, llevar una carga electrica y determinar la carga neta de las moleculas que se separan.

1. Indica los principales tipos de electroforesis y en qué consisten.

De frente móvil: los componentes de la muestra están presentes en toda la disolución y se determina ópticamente la posición del frente de avance o frontera con el disolvente.

Zonal: la muestra se aplica como una mancha o banda y sus componentes migran a través de un disolvente, utilizando además un medio que da soporte a éste. En este caso no se determina la movilidad, sino que el único objetivo de la técnica es separar los componentes de la muestra.

Continua: la muestra se aplica también en una zona, pero se suministra continuamente a lo largo del proceso (para más información, véanse las pp.250-2 de Freifelder, 1999).

1. ¿Qué es el pI y cómo se calcula?

Es el pH al que un polianfolito tiene de carga neta cero y puede ser calculada con la siguiente formula:

PI= ½ (pKa,1 + pKa,2)

1. Investigar el comportamiento ácido-base de los aminoácidos

Presentan un comportamiento basico ya que se puede protonar para dar –NH3 y presentan comportamiento acido ya que se puede desprotonar para dar –COO-

1. ¿De qué elementos consta una cámara de electroforesis? ¿Qué carga tienen el ánodo y el cátodo?

Tampon de pH, acrilamida y bisacrilamida, agente iniciador de polimeracion, agente catalizador de polimeracion, SDS. El anodo tiene carta positiva y el Catodo negativa.

1. Investigar la estructura química y valores de pka de los prolina, ácido glutámico y arginina.

Prolina- Tiene una estructura quimica de C₅H₉NO₂  y un valor de pKa de 10.47

Acido glutamico-  Tiene una estructura de C5H9NO4  Junto con 3 valores de pKa que son pKa1= 2,1 pKa2= 3,9 pKa3= 9,8

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