Cultivo de cianobacterias
Enviado por uriel yair • 27 de Noviembre de 2016 • Apuntes • 362 Palabras (2 Páginas) • 859 Visitas
Cultivo de cianobacterias
El medio BG-11 permite el crecimiento de una gran variedad de cianobacterias de suelo y agua dulce y se utiliza habitualmente para el mantenimiento de colecciones. Este medio utiliza concentraciones de nitrato muy altas y concentraciones de fósforo relativamente bajas (la relación molar en el medio es de 99:1), sin embargo la concentración de nitratos suele disminuirse. BG-110 carece totalmente de nitratos y se usa para el crecimiento de cianobacterias fijadoras de nitrógeno.
2.1.1 Cultivo de la cianobacteria Nostoc sp. LAUN015 2.1.1.1 Microorganismo
La cianobacteria Nostoc sp. LAUN015 perteneciente al cepario de Microalgas del Departamento de Biología de la Universidad Nacional de Colombia, Sede Bogotá. La cepa fue mantenida en el cepario en medio sólido BG11 en cajas de Petri, fotoperiodo 18:6 h luz/oscuridad, intensidad lumínica variable y temperatura ente 25°C y 32°C. 2.1.1.2 Condiciones de cultivo La cianobacteria se cultivó bajo condiciones estériles en medio BG11 líquido (ver anexo A) en volúmenes de 200 mL en recipientes de vidrio de forma aplanada de 375 mL y en volúmenes de 1L en recipientes de vidrio de forma cilíndrica de capacidad de 2L. El inóculo empleado fue de 5 %v/v proveniente de cultivos en medio líquido BG11 donde se había cultivado previamente la cianobacteria proveniente del cepario. La iluminación se realizó con lámparas de luz blanca Sylvania Standard F18T8/D, con intensidad lumínica de 250 lux en ciclos de luz-oscuridad de 18:6 horas. La aireación se realizó mediante un difusor de vidrio sumergido empleando aire atmosférico previamente esterilizado por filtro HEPA, la temperatura del cuarto de cultivo se mantuvo entre 25°C y 32°C. Al finalizar cada cultivo se monitoreó la contaminación por observación en el microscopio.
La cinética de crecimiento se realizó en recipientes de 375 mL con 200 mL de medio BG11; el inóculo en cada recipiente fue de 5 %v/v. Las condiciones de cultivo fueron las mencionadas en el numeral anterior. El crecimiento se determinó por peso seco de la biomasa obtenida (ver numeral 2.1.2) con descarte de las muestras empleadas. La producción de polisacárido se midió por el método fenol-ácido sulfúrico (Dubois et al. 1956) en el sobrenadante del cultivo. Todas las mediciones se realizaron por triplicado.
Bibliografía
http://www.bdigital.unal.edu.co/8956/1/300429.2012.pdf
https://www.google.com.mx/#q=bg+11+medio+de+cultivo
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