EXAMENES COPROPARASITOSCOPICOS

EXAMENES COPROPARASITOSCOPICOS

1.-GENERALIDADES

Un examen coproparasitoscopico es el estudio de la materia fecal para la búsqueda e identificación de formas parasitarias.

Los métodos coproparasitoscopicos se pueden dividir en: cualitativos y cuantitativos; los primeros se usan para saber que formas parasitarias existen y los segundos en que numero se encuentran; estos últimos sobre todo se utilizan en helmintiasis.

Los métodos cualitativos siguen diversas rutinas para su elaboración; en función a esto, habrá unos que exijan mas manipulación que otros; como ejemplo de los primeros están los métodos de concentración y en los otros el examen directo es un buen ejemplo. En seguida se describirán las diversas técnicas de los exámenes coproparasitoscopicos cualitativos.

EXAMEN DIRECTO

Antecedentes: este método es el mas antiguo que se conoce; por los datos históricos que se tienen en relación a los primeros microscopios, probablemente Anton va leewenhoek, a mediados del siglo XVII, fue de los primeros en utilizarlo, al encontrar y observar en sus propias heces fecales trofozoitos de Gardia lamblia.

El método tiene entre sus características, la sencillez y rapidez para llevarlo acabo, además de la economía que reporta realizarlo, pues es el que requiere de menos material.

Utilidad.- ha sido el método indicado como excelente para la búsqueda de trofozoitos. En la práctica ha demostrado su eficacia, cuando se utiliza lugol, para búsqueda e identificación de quistes, huevos y larvas.

Limitaciones.- la muestra utilizada es tan pequeña que es poco representativa.

Material.

A) reactivos.- cloruro de sodio, agua destilada, yodo cristaloide, yoduro de potasio.

b) soluciones: solución salina isotónica.

Cloruro de sodio 8.5g

Agua destilada c.b.p 1000ml

Se coloca el cloruro de sodio en un matraz volumétrico de un litro y se completa el volumen.

Lugol parasitológico: solución madre

Yodo cristaloide 5g

Yoduro de potasio 10g

Agua destilada 100ml

Se disuelve el yoduro de potasio en agua y en seguida se agrega el yodo, agitando constantemente para que se disuelva la mayor cantidad posible, se guarda en frasco ámbar, procurando que todo el exceso de yodo que queda en el fondo también se vacié en el frasco; esto se hace para que la solución permanezca con la concentración deseada durante mucho tiempo.

Solución de trabajo

Solución madre de lugol I volumen

Agua destilada I volumen

Se mezcla la solución madre con el agua destilada y se guarda la solución en gotero ámbar.

c) vidriería.

- portaobjetos de 25 x 72 mm

-cubre objetos de 22 x 22 mm

d) aparatos

-microscopio compuesto

e) otros

-aplicadores de madera o palillos

Método.

1.- en un portaobjetos se colocan, separadamente unas gota de solución salina y otra de lugol.

2.-con el aplicador de madera, se tomo al muestra de 1 a 4mg de heces y se mezcla con la solución salina, haciendo una suspensión homogénea.

3.- con el mismo aplicador se retiran las fibras y otros fragmentos gruesos.

4.-se coloca el cubreobjetos.

5.-se efectúa la misma operación en la gota de lugol.

6.- se tiene lista la preparación para observar al microscopio.

Forma de reportar.-la preparación con solución salina, sirve par identificar y reportar el hallazgo de trofozoitos. La preparación con lugol sirve para reportar el hallazgo de quistes, huevos, y larvas.

Precauciones.- la materia fecal es potencialmente infectante, por lo que se tendrá los cuidados necesarios para su manejo.

METODO DE AMIBA EN FRESCO

METODO DE AMIBA EN FRESCO:

Es un método, sencillo de realizar y que nos ayudará en la búsqueda de protozoarios, así como sus quistes y trofozoitos.

MATERIAL: REACTIVOS:

Mechero de Bunsen Yodo Lugol

Trípie

Tela de alambre

Vaso de precipitados

Tubos de ensayo

Pinzas para tubo de ensayo

Termómetro

TÉCNICA:

• Se colocan aproximadamente 1g de materia fecal dentro de un tubo de ensayo.

• Se le agrega agua al vaso de precipitados y se calienta con el mechero, se deja de calentar hasta que tenga una temperatura de 37º C.

• Se coloca el tubo dentro del vaso de precipitados con ayuda de las pinzas, evitando que se introduzca agua dentro del mismo y se deja reposar 5 minutos.

• Se procede a observarlo al microscopio a 10X y 40X.

Método de Graham

Este es el clásico método de raspado perianal para obtención de huevos de Enterobius vermicuralaris.

Antecedentes.- Fue héller en 1876 quien ideo el raspado anal para la obtención de huevos de oxiuros; más tarde, en 1941, Graham introduce su técnica de raspado, utilizando para ello, la cinta de celofán adhesiva. Mazzotti, en 1946, recomienda esta técnica para la búsqueda de huevos de Taenia sp. En la práctica, también se han encontrado huevos de A. lumbricoides, T. trichiura e Hymenolepis nana.

Utilidad.- Este es el método más efectivo para la búsqueda de huevos de E. vermicularis.

Material

c) Vidriería.

-Portaobjetos de 25 x 75 mm

d) Apartados.

-Microscopio compuesto

e) Otros

-Cinta de celofán adhesivo de 12 mm de ancho

-Abatelenguas

Método

1.- Se lo dan instrucciones al paciente para que llegue temprano al laboratorio, para la toma de muestra; que no se bañe ni defeque, para evitar el arrastre mecánico de huevos de E. vermiculares.

2.- Se toma el abatelenguas y en un extremo se coloca la cinta con la parte adherente hacia fuera; se sujetan ambos con los dedos pulgar e índice.

3.- Se coloca al paciente en posición genupectoral, exponiendo el esfínter anal y el periné.

4.- Se hace un raspado sobre la región perianal, moviendo el abatelenguas con el cinta hacia izquierda, derecha, arriba y abajo; por último se hace un raspado en la región perineal.

5.- Se separa cuidadosamente la cinta del abateleguas.

6.- Se adhiere la cinta al portaobjetos, anotando en un extremo del mismo, nombre, edad y sexo del paciente.

7.- Se lleva la preparación al microscopio y se observa objetivo 10x, cambiando al de 40x, cuando se tenga duda.

METODO DE FAUST

Examen CPS de concentración por centrifugación flotación.

Antecedentes.- fue en 1938 cuando Faust y Cols. Describieron su método que hasta la fecha es uno de los más utilizados. Es parecido al que describió Lane en 1924,solo que este, se utiliza solución saturada de cloruro de sodio; como este método es poco eficaz para quistes; se utiliza mas el de Faust que es muy eficaz para estas formas parasitarias.

Utilidad.- hace una buena concentración de quistes, huevos y larvas; es la técnica preferida por la generalidad de los laboratorios.

Limitaciones.- es poco eficaz para huevos pesados como los de Taenia sp. , Fasciola hepática u ovulos de Ascaris lumbricoides.

Material.

a) Reactivos.

-sulfato de zinc (puede utilizarse sulfato se zinc industrial, si se eliminan de la solución las sales insolubles mediante filtrado previo con unas gotas de acido sulfúrico).

-agua de la llave.

b) Soluciones.

-solución de sulfato de zinc con densidad de 1.180

Sulfato de zinc 350g

Agua de la llave 1000ml

Se disuelve el sulfato en el agua hasta disolución total de sal; se toma la densidad; si se pasa de 1.180, se le agrega agua y se homogeniza, si le falta, se le agrega pequeñas cantidades de la sal; hasta ligar la densidad deseada.

-lugol parasitológico

c) vidriería

-recipiente de vidrio o polietileno de 50 ml aproximadamente

-tubos de 13 x 100 mm

-embudos de vidrio o polietileno de 7.5 cm de diámetro

-portaobjetos de 75x 25 mm

-cubreobjetos de 22 x 22 mm

d) aparatos.

-centrifuga con camisas para tubos de 13 x 100

-microscopio compuesto

-densímetro graduado de 1.100 a 1.200° Baume

e) otros

-gasa cortada en cuadros de 15cm de lado

-gradilla

-aplicadores de madera

-abatelenguas

-asa de alambre terminada en circulo de 2 a 3 mm de diámetro, formando ángulo recto con el resto del alambre y montado en un tapón de corcho o caucho.

Método.

1.- se hace una suspensión homogénea con 1 a 2 g de materia fecal y 10 ml de agua de la llave.

2.- se pasa a través de la gasa colocada en el embudo y colectando la suspensión directamente del tubo

3.- los tubos así preparados, se centrifugan a 2,00 rpm durante un minuto.

4.- se decanta el sobrenadante y se re suspende el sedimento con agua, agitando con un aplicador.

5.- se centrifuga nuevamente y se vuelve a decantar el sobrenadante.

6.- se agrega 2ª 3 ml de solución de sulfato de zinc a los tubos y se homogeniza perfectamente, llenando los tubos hasta 0,5 a 1 cm por debajo de los bordes.

7.- se centrifuga a 2,000 rpm durante 1 minuto.

8.-

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