El objetivo de esta práctica es hallar las concentraciones de cinco soluciones problema a partir de su absorbancia.
marinagc98Práctica o problema28 de Octubre de 2017
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MÉTODO DE LOWRY
El objetivo de esta práctica es hallar las concentraciones de cinco soluciones problema a partir de su absorbancia.
RESULTADOS
Tubo | Agua | Patrón (2mg/ml) | Problema | Reactivo C | Folin.dil. | Absorbancia (580nm) |
0 | 1.0ml | - | - | 5ml | 0.5ml | Blanco |
1 | 0.9ml | 0.1ml | - | 5ml | 0.5ml | 0.216 |
2 | 0.8ml | 0.2ml | - | 5ml | 0.5ml | 0.343 |
3 | 0.7ml | 0.3ml | - | 5ml | 0.5ml | 0.400 |
4 | 0.6ml | 0.4ml | - | 5ml | 0.5ml | 0.586 |
5 | 0.7ml | - | 0.3ml | 5ml | 0.5ml | 1.33 |
6 | 0.5ml | - | 0.5ml | 5ml | 0.5ml | 1.543 |
7 | 0.5ml | - | 0.5ml (1:10) | 5ml | 0.5ml | 1.341 |
8 | 0.5ml | - | 0.5ml (1:100) | 5ml | 0.5ml | 0.805 |
9 | 0.5ml | - | 0.5ml (1:1000) | 5ml | 0.5ml | 1.008 |
ANÁLISIS DE RESULTADOS
Se traza una recta patrón con los resultados obtenidos a partir de la disolución patrón. De este modo, representando los puntos de los resultados de disolución problema podemos conocer las concentraciones proteicas de estas muestras sustituyendo los valores de absorbancia obtenidos para cada muestra en la fórmula despejando las concentraciones:
Abs= cl[pic 1]
ε= coeficiente de extinción molar; c= concentración; l= longitud de la cubeta (1cm)
Para poder hacer la recta es necesario hallar la concentración final de la disolución patrón. La concentración inicial del patrón es de 2 mg/ml, por lo que multiplicando ésta por el volumen que hemos utilizado y dividiendo por el volumen final (6.5 ml) obtenemos la concentración final.
- Tubo 1: [pic 2]
- Tubo 2: [pic 3]
- Tubo 3: [pic 4]
- Tubo 4: [pic 5]
Tubo | Concentración | Absorbancia |
1 | 0.031 | 0.216 |
2 | 0.062 | 0.343 |
3 | 0.092 | 0.400 |
4 | 0.123 | 0.586 |
[pic 6]
Ecuación de la recta patrón
y=3,8178x+0,0923
Una vez que tenemos la recta patrón y su ecuación sustituimos los valores de la absorbancia de los tubos de las soluciones problemas y calculamos la concentración de proteínas en moles/litro:
- Tubo 5:
1,33=3,8178x+0,0923; x=0,324M
- Tubo 6:
1,543=3,8178x+0,0923; x=0,38M
- Tubo 7:
1,341=3,8178x+0,0923; x=0,327M
- Tubo 8:
0,805=3,8178x+0,0923; x=0,187M
- Tubo 9:
1,008=3,8178x+0,0923; x=0,24M
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