Extraccion De Adn
pabloro1520 de Junio de 2013
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INTRODUCCION
Lo más probable es que cuando te mencionen extracción de ADN pensarás que es algo muy difícil de hacer, a pesar de la complejidad de su nombre no es tan complicado, solo debes seguir paso a paso las indicaciones correspondientes.
El ADN se encuentra en todo organismo, tanto vegetal como animal, en este laboratorio utilizaremos un plátano, al cual extraeremos su ADN mediante diferentes procedimientos, para poder extraerlo debemos romper sus células, luego separar el material genético del resto de los componentes, ya sean proteínas y/o membranas y finalmente observar los resultados.
Antes de empezar la actividad de laboratorio, debemos tener conocimientos básicos acerca del ADN, ¿que es?, ¿como esta constituido?, su importancia para todo organismo, entre otros.
ASPECTOS TEÓRICOS
El ADN (Acido desoxirribonucleico) contiene la información genética de cada organismo, controla todos los procesos vitales para los seres vivos y es el principal constituyente de los cromosomas, se encuentra en el núcleo de la célula.
Esta constituido por muchos nucleótidos, cada nucleótido esta formado por una base nitrogenada (Adenina, Timina, Guanina y Citocina), por un Grupo Fosfato y Una Pentosa (en el caso del ADN por desoxirribosa).
Las Bases Nitrogenadas, tienen la característica de complementarse entre ellas, a través de enlaces puente hidrógeno, existen las bases púricas (Adenina y Guanina y pirimidicas (Timina y Citocina), la complementariedad de bases se da entre una purica y una pirimidicas, es decir, Adenina con Timina y Guanina con Citocina.
MATERIALES
Un trozo de Plátano
Etanol
Agua Destilada
Ablandador de Carne
Sal (Cloruro de Sodio)
Detergente Liquido
2Tubos de Ensayo
Mortero
Pipeta
Balanza
Bagueta
PROCEDIMIENTO
1.- Pesar un gramo de sal en la balanza y colocarla en el mortero.
2.- poner 9 ml de agua destilada y 1 ml De detergente líquido en el mortero.
3.- Colocar el trozo de plátano en el mortero con los 10 ml. De la solución de sal y detergente.
4.- Aplastar y moler el tejido hasta que se forme una pasta
5.- Pese 2 gramos de ablandador de carne y colóquelo en el mortero y siga revolviéndolo.
6.- Mezcle y continúe revolviendo la mezcla (llamada lisado) en el mortero.
7.- Coloque la mezcla en el tubo de ensayo y manténgalo en un baño de agua caliente a 55°C – 60°C por 10 minutos. Si el agua no se mantiene a esa temperatura, ose calienta por mas de 10 minutos, el ADN puede desintegrarse. El tratamiento de calor suaviza los Fosfolipidos en la membrana celular y desnaturaliza las enzimas de ADN las cuales, si están presentes, podrían cortar el ADN en pequeños fragmentos y no podría ser extraído.
8.- Enfriar la mezcla en un baño de hilo por minutos.
9.- Filtrar la mezcla de lisado (gruesa y fluida como la miel) utilizando gasa, y recibir la mezcla en un tubo de ensayo de plástico limpio y seco.
10.-Echa por el borde del tubo 10 ml. De etanol frio, con la idea de formar una capa de alcohol visible sobre el lisado. Inmediatamente comenzaran a formarse burbujas alrededor de las hebras de ADN.
CUESTIONARIO
1.- ¿Qué función cumple la sal?
La sal evita la unión de las proteínas del ADN y aumenta su solubilidad.
2.- ¿Qué función
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