Flavonoides
Enviado por crichemist • 6 de Febrero de 2013 • Tesis • 204 Palabras (1 Páginas) • 403 Visitas
TITULO. Flavonoides
OBJETIVO: Determinar las condiciones experimentales para separar flavonoides de un extracto polar, mediante TLC.
METODOLOGÍA.
1. REACCION DE SHINODA.
En un tubo de ensayos, tomar 1 ml de fracción polar, añadir unos mg de limaduras de magnesio y gotas de HCl concentrado, verificar el aparecimiento de color rosa a rojo, que indica presencia de flavonoides. En el mismo tubo, añadir NaOH 10% y verificar si hay cambio de color a la gama del azul por cambio en la conjugación de los anillos.
2. CONCENTRACION DE LA FRACCION POLAR
La fracción polar extraída concentrar a un volumen de aproximadamente 50 ml o menor.
3. SEPARACION Y PURIFICACION DE LOS FLAVONOIDES.
3.1. Determinación de las condiciones de separación.
• Preparar un cromatofolio de sílica gel de 10 x 3 cm, activarlo durante 30 min a 110°C y enfriar en desecador.
• Preparar una cámara cromatográfica saturada con eluyente.
• Sembrar la muestra concentrada a 1 cm del borde inferior de la placa, con un tubo capilar limpio, marcar el inicio de la cromatografía.
• Introducir la paca seca en la cámara y correr la cromatografía hata aproximadamente 1 cm del borde superior de la placa, marcar el recorrido del eluyente.
Para determinar las condiciones de separación, se debe probar con todos los eluyentes que se dan en la tabla a continuación:
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