Fraccionamiento Celular
Enviado por ulrike • 30 de Septiembre de 2013 • 749 Palabras (3 Páginas) • 1.381 Visitas
Fraccionamiento celular
El fraccionamiento celular es usado para investigar la bioquímica y fisiología de organelos fuera del ambiente complejo de la célula intacta.El fraccionamiento celular permite separar los componentes de las células. Las membranas y organelos celulares.
Es necesario un procedimiento para liberar los componentes celulares en forma soluble de la célula intactos o de la estructura del tejido sin provocar pérdidas de actividad. Normalmente se emplea la trituración mecánica u homogeneización de los tejidos animales para romper las membranas celulares y liberar los contenidos celulares. Con las bacterias, las levaduras y muchas células vegetales, se necesitan procedimientos mucho más vigorosos para romper las gruesas paredes celulares, por ejemplo la radiación sónica, la trituración o la fragmentación en una prensa de elevada presión. A veces la pared celular puede ser debilitada por medio de un tratamiento con ciertas enzimas.
La homogeneización es un término que se utiliza en muchos capos como en química, ciencias agrícolas, tecnología de alimentos y biología celular.
La homogeneización se trata de disgregar los tejidos y romper las células con el menor daño a la membrana plasmática y los orgánulos celulares.
La centrifugación es una técnica de separación y purificación, se utiliza para separar o aislar partículas aprovechando sus distintas velocidades de sedimentación. La centrifugación diferencial se basa en la diferencia de la densidad de las moléculas. Al realizar la centrifugación se obtienen fracciones enriquecidas
100g X 10min. Fracción nuclear
10 000g X 15 o 20 min. Fracción mitocondrial:
Mitocondrias
lisosomas
peroxisomas
80 000 a 100 000g X 1 hora Fracción microsomal:
microsomas
vesículas pequeñas
sobrenadante:
ribosomas
virus
macromoléculas
Ultracentrifugación 150 000g Para concentrar los iones
El parámetro según el cual se separan las moléculas y las partículas en este tipo de centrifugación es su coeficiente de sedimentación (s); éste es un reflejo de la forma y el tamaño de la molécula o partícula, y de él depende la velocidad con la que ésta sedimenta.
El coeficiente de sedimentación, s, se define como la razón entre la velocidad V a la que sedimenta
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