INFORME DE PRACTICA DE LABORATORIO No. 1

INFORME DE PRACTICA DE LABORATORIO No. 1

 TINCIÓN DE GRAM

Grupo No. 2   Equipo No. 4

MATERIALES:

• 2 portaobjetos.
• Asa bacteriológica.
• Aceite de inmersión.
• Cristal violeta.
• Yodo de Gram.
• Etanol al 95%
• Safranina.
• Microscopio.
• Mechero.
• Puente de tinción.
• Cepas de Gram negativos (Escherichia Coli) y Gram positivos (Staphylococcus aureus).

PROCEDIMIENTO:

• Se utilizó Portaobjetos y se colocó 1 gota de agua en cada portaobjetos, y se prepararon los frotis: uno de E. Coli y en el otro S. Aureus,

• Con el asa estéril se tomó una muestra de la colonia, se mezcló con el agua, se procedió a secar y luego se fijamos la muestra con el mechero.

• Se Tiñó con cristal violeta por un minuto, seguido se enjuago cuidadosamente con agua corriente y se escurrió.

• Se cubrió con Lugol o Yodo de Gram y se dejó reposar por un minuto, seguidamente se enjuagó con agua corriente suavemente.

• Luego se decoloro la muestra con 3 gotas de etanol al 95% (Alcohol-Acetona),

• Por último, se aplicó safranina por 30 segundos, para contrastar, se enjuagó y seco el frotis con el mechero. Seguidamente se examinó en el microscopio con el objetivo 10, se aplicó aceite de inmersión y se aumentó el objetivo a 100.

RESULTADOS:[pic 1]

• Tipo de muestra: S. aureus.
• Estreptococo
• Gram Positivo.

Por la estructura de su pared celular retiene el cristal violeta, después de la coloración por lo que adopta el color violeta o morado.

[pic 2]

• Tipo de muestra: E. Coli
• Cocobacilo
• Gram Negativo

Debido a las características en la estructura de su pared no pueden retener el cristal violeta después de la decoloración por lo que adopto un color rojo de contraste safranina.

DISCUSION DE RESULTADOS:

S. Aureus: En esta muestra se observó de color morado indicando que es una bacteria Gram positiva y las características de esta bacteria son su pared gruesa de peptidoglucano quien da el soporte, resistencia y rigidez a la célula, también contiene ácido tecoico y lipotecoico que proporciona una resistencia inmunológica únicamente en las bacterias Gram positivas.

E.Coli: En la muestra se observó de color rosado esto característico de una bacteria Gram negativa con una pare delgada debido a que contiene poca cantidad de peptidoglucano, además contiene una membrana externa que contiene distintas proteínas y canales proteicos, también tiene polisacáridos que le dan resistencia inmunológica única en estas bacterias Gram Negativas

CONCLUSIONES:

• Cada microorganismo va dar diferente coloración en la tinción de Gram, se debe a que cada bacteria contiene diferentes cantidades de peptidoglucano en su pared celular, ya que este es muy importante porque de eso depende la capacidad de retención o absorción de la tinción. Como sucedió en las bacterias Gram positivas ellas tienen pared celular gruesa quien le da una capacidad mayor en la absorción de la tinción por lo que se ve el color morado, en cambio con las negativas su pared es delgada la absorción de la tinción es menor por lo que se tiñen de rosado.

• Las baterías Gram negativas y positivas son diferentes en su contenido estructural, entre ellas podemos decir que las Gram positivas tienen ácido tecoico y lipotecoico que ayuda a la resistencia inmunológica frente a los antígenos y las Gram negativas contiene lipopolisacaridos que está compuesta por: antígeno O, región R y lípido A, endotoxina que su función darle capacidad de resistencia frente a antígenos.

• La E. Coli es un microorganismo que forma parte de la microbiota normal del sistema digestivo principal en el estómago, esta bacteria fermenta la glucosa y lactosa ayudando al anfitrión estando en condición de salud adecuada, esta bacteria no provoca ninguna alteración, pero cuando el sistema inmunitario se encuentra bajo el nivel de E. Coli aumenta provocando patologías.

• El Bacteria S. Aureus es un coco Gram positivo que contiene coagulasa positiva (ayuda a la formación de fibrinógeno en fibrina) puede ser anaerobia y aerobia, encontrándose en la microflora normal de la piel, mucosas: contienen diferentes toxinas que son responsables de factor de virulencia y la aparición de distintas enfermedades.

Bibliografía

1. Jawetz, Melrick, & Aldelberg. (2008). Microbiologia Medica. Mexico: Moderno.
2. Murray, P. R. (2009). Microbilogia Medica (6 ed.). España: Elsevier Mosby.

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