INSTITUTO DE CIENCIAS BIOLÓGICAS BASES BIOLÓGICAS Y BIOQUÍMICAS

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INSTITUTO DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

BASES BIOLÓGICAS Y BIOQUÍMICAS

Compuestos Orgánicos

Carrera:

Odontología                                    Docente: Luís Morales Quintana

Integrantes:

Marisol Osorio Ramírez

Fernanda Quintanilla Lemp

Marion Rubio Maturana                  Ayudantes: Javiera Islas Bueno    

                                                                             Loreto Monosalva Yañez 

Talca, 18 de Abril de 2017

Introducción

La materia se divide en inorgánica y orgánica, en esta última podemos encontrar carbohidratos, lípidos, proteínas y ácidos nucleicos. Cada una de estas biomoléculas pueden ser identificadas por una gran variedad de pruebas químicas y físicas de forma cualitativa. Estos test otorgan una coloración específica dependiendo de la biomolecula que se quiera detectar. En el caso de los carbohidratos, como por ejemplo el almidón, al ser puesto a la prueba del lugol el resultado debería ser que la muestra se torne de color oscuro casi negro; esto se debe a su estructura y la adsorción del I3 por las cadenas helicoidales, especialmente de la amilosa. Siguiendo con los carbohidratos, “Una forma rápida para probar la presencia de glucosa en una muestra es agregar solución de Benedict, un reactivo con cobre. La solución de Benedict es un líquido de color azul claro en su estado puro, pero cuando se agrega a la glucosa y se calienta, se vuelve marrón anaranjado”(1),  el color celeste que da el Benedict está presente en el almidón, sacarosa y glucosa como es de esperar, pero al ser calentados se espera que solo la glucosa tome el color ladrillo característico de un azúcar reductor. Por otro lado, los lípidos son biomoléculas compuestas principalmente por carbono e hidrógeno y en menor medida oxígeno, aunque también pueden contener fósforo, azufre y nitrógeno, son hidrofóbicas pero solubles en compuestos orgánicos como el benceno. Para demostrar la presencia de lípidos se utiliza la técnica del Sudán III (o IV) la cual consiste en la tinción de triglicéridos, de color rojizo, por ende, se espera que al agregar Sudán III a las grasas esta se torne de color rojizo. En el caso de las proteínas, estas se pueden reconocer mediante el test de Biuret, por lo tanto si se agrega Biuret a la proteína este reconocerá los enlaces peptídicos formando un color violeta debido a la coordinación entre los iones Cu+2 y los pares no compartidos del nitrógeno que forma parte de los enlaces peptídicos.

Las proteínas son las biomoléculas más versátiles y diversas, debido a que están formadas por largas cadenas de aminoácidos que se organizan de manera diferente, permitiéndoles así cumplir funciones específicas. Estos aminoácidos se unen a través de diferentes enlaces químicos formando estructuras que se pueden clasificar en cuatro tipos. En la estructura primaria los aminoácidos se unen por enlaces peptídicos y forman una secuencia lineal, la secundaria es la disposición de la secuencia en el espacio y se logra a través de puentes de hidrógeno formando alfa hélice y hojas beta, la terciaria es la disposición tridimensional de la molécula, en la cual se hace presente el enlace disulfuro, característico de esta estructura y por último la cuaternaria que es la interacción de dos o más cadenas peptídicas a través de enlaces débiles. Estos enlaces se pueden deshacer provocando que la proteína pierda su función, a esto se le conoce como desnaturalización y no afecta a la estructura primaria de la proteína. La desnaturalización puede ser reversible, ya que los puentes de hidrógeno se pueden volver a formar luego de un tiempo, y la proteína recupera su función. La albúmina es puesta a prueba en este experimento y se demostrará los cambios que presenta al desnaturalizarla alterando factores como la temperatura y el pH.

Objetivo general:

- Observar e identificar las reacciones positivas o negativas de las biomoléculas: carbohidratos lípidos y proteínas ante la preparación de muestras.

Objetivos específicos: 

- Identificar mediante métodos cualitativos la presencia de carbohidratos, lípidos, proteínas.

- Comprender el porqué de las tinciones y no tinciones en las diferentes biomoléculas.

- Utilizar correctamente el microscopio óptico compuesto.

- Reconocer y caracterizar amiloplastos en gránulos de almidón.

- Reconocer y caracterizar adipocitos en tejido graso de animal.

Materiales y métodos

Practico 1

 - Microscopio compuesto

- Porta y cubre-objetos

- 8 tubos de ensayo, resistentes al calor

- 8 pipetas de 2 a 5 ml o goteros

 - Gradilla para tubos de ensayo

- Una hoja de afeitar nueva

 - Solución de lugol

- Solución de Sudán III ó IV

- Solución de Benedict

- Solución de Glucosa 1%

- Solución de Sacarosa 1%

- Solución de Almidón 1%

- Una papa

- Un trozo pequeño de grasa animal

- Aceite de cocina

- Agua destilada

- Pinzas

- Vasos de precipitados

- Mechero

- 8 Agitadores de vidrio

- Lápiz marcador de vidrio

Procedimiento:

1. Test del Lugol y test de Benedict

 a. Se numeraron 6 tubos de ensayo de 1 a 6.

b. A los tubos 1 y 2 se les agrego 1 ml de almidón.

c. A los tubos 3 y 4 se les agrego 1 ml de sacarosa

d. A los tubos 5 y 6 se les agrego 1 ml de glucosa

e. A los tubos 1, 3 y 5 se les agregó una gota de solución de lugol. Se observó y se anotaron los resultados

f. A los tubos 2, 4 y 6 se les agrego aproximadamente 10 gotas de solución de Benedict

g. Luego se les calentó con un mechero y se anotaron los resultados observados

1. Identificación de lípidos:

1. Se colocó en un tubo de ensayo 1 ml de aceite de cocina y 1 ml de agua destilada.
2. Se agregaron 4 gotas de Sudán.
3.  Se agitó la mezcla y se observó inmediatamente. Se anotaron los resultados
4. Se dejó reposar el tubo y, al cabo de 5 minutos, se observó y se describieron los resultados.

OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA.  

1. Gránulos de Almidón.

Por medio de la hoja de afeitar se hizo un corte muy fino del tubérculo de papa y se colocó sobre un porta objetos. Se realizó una preparación utilizando lugol diluido como medio de montaje y observó al microscopio usando el objetivo 40X. Se hizo un esquema de lo observado

2. Observación de tejido adiposo.

 Usando una hoja de afeitar se obtuvo un corte delgado de la grasa animal. Se montó en el portaobjetos y agrego una gota de Sudán III. Posteriormente se cubrio con el cubreobjetos y presionó suavemente. La preparación se colocó sobre la platina del microscopio, se enfocó y observo con el objetivo de aumento menor (10X), y luego con el objetivo de aumento mayor (40X). Se construyó un esquema y describió lo observado

Resultados

1. Test de lugos y test de Benedict

1. Identificación de lípidos

La muestra inicial de aceite de cocina con agua destilada tenía un color amarillo y al agregarle las gotas de Sudán y agitarlo, la muestra cambia a un color naranja intenso en la parte de arriba de la muestra. Al dejarlo reposar se notan dos fases en la muestra.

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