Microoscopio

PRACTICA #1

MICROSCOPIOS Y MICROSCOPIA

OBJETIVO DE LA PRACTICA.

Que el alumno se familiarice con las partes del microscopio de luz, con su manejo y sus

cuidados y que conozca el fundamento de las diferentes clases de microscopios.

INTRODUCCION.

El microscopio es el instrumento más frecuentemente utilizado y el más útil en el

laboratorio de microbiología, debido a que proporciona la amplificación o agrandamiento

aparente que nos permite ver organismos y estructuras invisibles a simple vista, con una

amplificación desde cien a cientos de miles de veces. Las dos categorías de microscopios

disponibles son los microscopios ópticos (de luz) y los microscopios electrónicos.

I. EL MICROSCOPIO OPTICO (de luz):

Utiliza un sistema de lentes ópticos que va amplificando la imagen sucesivamente y comprende: -

microscopio de campo claro -microscopio de campo obscuro -microscopio de fluorescencia -

microscopio de contraste de fases.

1. El Microscopio de Campo Claro: Es el instrumento más ampliamente utilizado para

microscopía de rutina. Aquí el área observada está brillantemente iluminada y los objetos en estudio

aparecen más obscuros. Generalmente producen un aumento útil de unos l000 diámetros. La

amplificación se logra mediante el uso de sistemas de lentes diseñadas y acomodadas para

proporcionar la amplificación en forma óptima. Presenta lentes en el condensador, en los objetivos y

en los oculares. La lente del condensador enfoca un cono de luz sobre el campo donde se coloca la

muestra. Algunos de los rayos de luz de este cono pasan directamente a la lente del objetivo para

formar el fondo de luz o campo claro. Los rayos de luz que chocan con los objetos

(microorganismos) que hay en la muestra y se "curvan", son conducidos a la lente del objetivo para

formar una imagen del objeto. La imagen es amplificada por la lente ocular. Comúnmente los

microscopios están equipados con tres objetivos montados en una plataforma llamada revólver, que

al hacerse girar pone a uno de ellos en la línea del condensador. y cada uno proporciona distinto

grado de aumento El poder de resolución de un microscopio está determinado por la longitud de onda

de la luz y por una propiedad del objetivo y de la lente del condensador.

Sistema mecánico: Base, brazo, cuerpo del tubo, tubo intercambiable del microscopio,

platina, revólver, objetivos de de 10, 40 y 100 X, tornillo macrométrico, tornillo micrométrico,

condensador y diafragma.

2 Microscopio de Campo Oscuro: Es similar al de campo claro, excepto que va equipado con

un condensador de campo oscuro y una abertura numérica baja. Esta clase de condensador dirige los

rayos de luz dentro del campo de la muestra, formando un angulo tal, que solo los rayos que chocan

contra el objeto que hay en el campo de la muestra son refractados (curvados) y penetran en el

objetivo. Así, el objeto queda brillantemente iluminado y destaca sobre el fondo oscuro (campo

oscuro)

3 Microscopio de Fluorescencia: Está equipado con una fuente de luz ultravioleta, varios

filtros y un condensador de campo obscuro. Se usa para examinar muestras teñidas con colorantes de 10

fluorocromo, denominados fluorescentes, los cuales absorben energía de longitudes de ondas cortas

invisibles, pero emiten ondas de longitudes de onda mayores visibles y el fenómeno es denominado

fluorescencia. Esta técnica permite la identificación rápida de algunos microorgnismos.

4 Microscopio de contraste de fases: Es un tipo de microscopio óptico que permite un mayor

contraste entre substancias de diferente grosor o diferente índice de refracción, mediante el uso de un

condensador y un objetivo especiales que controlan la iluminación del objeto, de manera que acentúa

las ligeras diferencias en el espesor o en los índices de refracción de las estructuras celulares. Las

diferencias se revelan en forma de distintos grados de brillo o de oscuridad (un mejor contraste),

pudiendo localizarse estructuras dentro de la célula sin teñir, que no son visibles en la microscopía de

campo claro.

EL MICROSCOPIO ELECTRONICO

Emplea haces de electrones en lugar de ondas de luz, para producir una imagen amplificada. Un

campo magnético substituye a las lentes. Es posible lograr amplificaciones de un millón de veces, las

que posteriormente se logran ampliar más en la imagen fotografiada. Esto hace posible la

observación de microorganismos tan pequeños, que no se ven con el microscopio óptico, como los

virus. -Microscopio electrónico de transmisión: Un haz de electrones finamente enfocados,

pasa

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