Osmosis en globulos rojos

OSMOSIS EN GLOBULOS ROJOS

INTRODUCCIÓN

La ósmosis es un fenómeno de difusión de un solvente a través de una membrana. El agua se difunde de regiones de bajas concentraciones de sales a otras de altas concentraciones. Así por ejemplo, si se separa una solución concentrada de otra solución diluida, por medio de una membrana, las moléculas de agua atraviesan la membrana desde la solución diluida hacia la concentrada. Este tipo de membranas que permiten el paso de ciertas moléculas, pero no de otras, se conoce como membranas semipermeables. Las membranas de la célula en un organismo vivo son de este tipo, además que son selectivas, es decir, permiten el paso de sustancia que solo a la célula le “interesa”, en un momento determinado (fig. 1A).

La osmosis entre dos soluciones continúa hasta cuando se alcanza igual concentración en ambos lados de la membrana. La presión necesaria para alcanzar este estado se conoce como presión osmótica y a mayor concentración de una solución, mayor será la presión osmótica. En las células animales, aunque éstos poseen un mecanismo de osmoregulación, si se presenta una diferencia muy alta de concentraciones, puede observarse un proceso de rompimiento celular debido al hinchamiento de la célula por la excesiva acumulación de agua dentro de ella. Este fenómeno se conoce como hemólisis cuando le sucede a los glóbulos rojos (Fig. 1A,B).

1. OBJETIVOS

Al finalizar esta práctica, el estudiante estará en capacidad de:

• Comprender el fenómeno de la osmosis en células de animales.

• Preparar diferentes soluciones por el método de diluciones.

• Conocer las concentraciones fisiológicas ideales de la célula para sales y glucosa.

1. MATERIALES

• Tubos de ensayó

• Erlenmeyers

• Pipetas Pasteur

• Espectrofotómetro

• Centrífuga Clinica

• Micropipeta de 50 μL

Los estudiantes de deebn de traer ese día:

• Vacutainer con anticoagulante

• Jeringa con camisa

2. REACTIVOS

• Soluciones de NaCl (0.1%, 0.2%, 0.4%, 0.7% y 0.9%).

• Soluciones de glucosa (0.5%, 1%, 2%, 4% y 6%).

3. METODO

o Método A

Tome 11 tubos de ensayo y rotule 5 con los diferentes concentraciones de solución salina y 5 con las concentraciones de glucosa, el onceavo rotúlelo como agua destilada. Adicione luego a cada tubo 5 mL de la solución respectiva y 50 μL de sangre heparinizada. Deje reposar por 10 minutos mezclando por inversión de vez en cuando. Al termino de los 10 minutos observe los tubos y verifique diferencias en la coloración. Centrifugue después de 10 minutos a 1700 g. Observe y concluya. Lea la absorbancia en el espectrofotómetro a 550 nm.

o Método B

Tome nuevamente 11 tubos de ensayo y rotule como en el método A. Deje reposar por 10 minutos mezclando por inversión de vez en cuando. Adicione a cada tubo 5 mL mas de la solución respectiva y 1 mL de solución de eritrocitos al 4%. Luego incube a 37 C por una hora al termino de la cual centrifugue por 10 minutos a 1700 g.

Luego tome 2 mL de sobrenadante de cada tubo y llévelos a otra serie de tubos rotulados igualmente y adicione a cada uno 5 mL de reactivo de Vam Kampen. Deje reposar durante 10 minutos y finalmente lea la absorbancia en el espectrofotómetro a 550 nm.

o Preparación de la Solución de Eritrocitos al 4%

- Tome 5 mL de sangre heparinizada y centrifugue 10 minutos.

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