PIA Técnicas microbiología

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Universidad Autónoma de Nuevo León Facultad de Ciencias Biológicas

Técnicas básicas en microbiología

PPA2

Profesora: Mayra Govea Gómez        Equipo:1

Carrera: LCA        Grupo:331

Fernando Iván Araujo Morales        #1968971

Reynaldo Blanco Bazaldua        #1959291 Valeria Alexandra Casas González #1594320 Amanda Valeria Campa Ovalle        #1915019

Introducción

Nuestra muestra a procesar será de agua estancada para detectar Escherichia coli mediante el método: control Microbiológico de Aguas Recuento y detección de Bacterias coliformes y Escherichia coli según ISO 9308- 1:2000. Por medio de un ensayo rápido.

El microorganismo más común de encontrar dentro del agua estancada es la bacteria Escherichia coli, son bacilo Gram-negativas, Lactosa-positivas y oxidasas negativas. Se muestra como una amenaza hacia la salud, por el hecho de que la muestra paso por aguas residuales, es por esto que se tiene que evitar a toda costa tomar o tener algún tipo de contacto físico con este tipo de aguas residuales o aguas estancadas ya que al tener una herida abierta aunque sea mínimamente pequeña, la bacteria puede entrar a nuestro sistema provocando infecciones urinarias, enfermedades respiratorias, infecciones del torrente sanguíneo, infecciones intestinales causando diarrea grave o con sangre, infección de la próstata, infecciones en el flujo sanguíneo, dolor abdominal, meningitis en recién nacidos, infecciones de pie diabético e infección en la vesícula biliar.

 Para la realización de pruebas con la muestra a analizar se necesita saber más acerca de la misma, por ejemplo, cuando hablamos de esta se hace referencia al agua que permanece dentro de las conducciones de tubería, mangueras, charcos, lagos, lagunas, humedales, pantanos, etc. Se empieza a considerar que está estancada cuando el agua permanece inmóvil durante aproximadamente por más de 4 horas, propiciando condiciones perfectas para el crecimiento de bacterias, virus y el parasito Criptosporidiosis (Cryptosporidium).

Materiales:

• Matraz Kitasato.
• Embudo.
• Bomba de vacío.
• Filtro de membrana de nitrocelulosa estériles con tamaño de poro de 0.4 μm de diámetro de poro.
• Medio de cultivo Soja Triptona (TSA).
• Pinzas estériles.

Metodología

Recoger la muestra en un recipiente estéril y de forma aséptica. Transportar y neutralizar los agentes antimicrobianos presentes. Se utiliza el método de filtración por membrana. Filtrar el volumen 100 ml de muestra a través de membrana estéril de 0,45 micras de diámetro de poro. Lavado. Disposición de la membrana sobre la superficie de medio de cultivo Soja Triptona (TSA), Agar con ayuda de pinzas estériles. La membrana se depositará con cuidado y sin dejar burbujas de aire entre ésta y la superficie del medio. La cuadrícula de la membrana se dispondrá hacia arriba. Invertir las placas e incubar aeróbicamente a 36±2 ºC durante 4-5 horas. Transferir la membrana, de forma aséptica sobre la superficie del medio TBA Agar e incubar a 44±0,5 ºC durante un periodo de 19 a 20 horas. observar las colonias decolor rojo: Escherichia coli.

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