PRESENTACION DEL PETROLEO Y EL EFECTO INVERNADERO

LABORATORIOS EXPERIMENTALES

D-OP-03-19-01

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PRÁCTICA No. 1

NOMBRE: Extracción de ADN

OBJETIVO: Extraer el ADN de diferentes muestras vegetales

ANTECEDENTES TEÓRICOS: 

El ácido desoxirribonucleico, frecuentemente abreviado como ADN, es un ácido nucleico que contiene instrucciones genéticas usadas en el desarrollo y funcionamiento de todos los organismos vivos conocidos y algunos virus, y es responsable de su transmisión hereditaria. El papel principal de la molécula de ADN es el almacenamiento a largo plazo de información. Los segmentos de ADN que llevan esta información genética son llamados genes, pero las otras secuencias de ADN tienen propósitos estructurales o toman parte en la regulación del uso de esta información genética.

Desde el punto de vista químico, el ADN es un polímero de nucleótidos, es decir, un poli nucleótido o polímero. Las unidades de éste polímero se le llaman nucleótidos que están formados a su vez de un azúcar Desoxirribosa, un grupo fosfato y una base nitrogenada (A, G, C y T). En las células eucariotas se encuentra en los núcleos y en los procariontes está ubicado en el citoplasma.

Las funciones biológicas del ADN incluyen el almacenamiento de información (genes y genoma), la codificación de proteínas (transcripción y traducción) y su auto duplicación (replicación del ADN) para asegurar la transmisión de la información a las células hijas durante la división celular.

La extracción de ADN requiere una serie de etapas básicas:

1. En primer lugar tiene que romperse la pared celular y la membrana plasmática para poder acceder al núcleo de la célula. A continuación debe romperse también la membrana nuclear para dejar libre el ADN. Los jabones utilizados como lavavajillas emulsionan los lípidos de las membranas celulares y las rompen.

1. La sal evita la unión de las proteínas al ADN.

1. Para aislar el ADN hay que hacer que precipite en alcohol. El ADN es soluble en agua, pero cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y precipita en la interfase entre el alcohol y el agua. Además de permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros componentes celulares, los cuales son dejados en la solución acuosa.

MATERIAL: 

SUSTANCIAS: 

PROCEDIMIENTO:

1.- Pon en una licuadora:

• Tu fuente de ADN (más o menos 100 ml o 1/2 de taza )
• Un pellizco grande de sal de mesa (menos de un ml o 1/8 de cucharadita)
• Agua fría. El doble de la cantidad de tu fuente de ADN (más o menos 200 ml o 1 taza)
• Licua todo a alta velocidad por 15 segundos.

El licuado separa las células de las muestras vegetales unas de otras, por lo que ahora tienes una muy diluida sopa de células de vegetales.

2.- Vierte tu sopa de células  a través de un colador dentro de un vaso de precipitados.

¿Cuánta sopa tienes?

• Añade como 1/6 de esa cantidad de detergente líquido (más o menos 30 ml o dos cucharadas soperas) y mézclalo.
• Deja reposar la mezcla 10 minutos.
• Vierte la mezcla en tubos de ensayo, cada uno como 1/3 lleno.

3.- Añade un pellizquito de ablandador a cada tubo de ensayo y agítalo suavemente. iSe cuidadoso! Si lo agitas demasiado fuerte romperás en ADN haciéndolo más difícil de ver.

El ablandador de carne se utiliza como enzima. Si no puedes encontrar ablandador, intenta usar jugo de piña o solución limpiadora para lentes de contacto.

4.-  Ladea tu tubo de ensayo y lentamente vierte el alcohol etílico por   la pared del tubo de manera que forme una capa sobre la mezcla de células.

Sigue vertiendo hasta que tengas en el tubo aproximadamente la misma cantidad de alcohol que de mezcla de células.

El ADN se elevará desde la mezcla de células hasta la capa de alcohol.

5.- Puedes usar un palito de madera u otro tipo de gancho para arrastrar el ADN que está en el alcohol.

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