Procariotas

PROCARIOTAS

Procariotas

• Especies bacterianas

• Arqueobacterias y eubacterias

• Tamaño un milésimo de la célula eucariota más pequeña (0,5-1 x 2 a 5 um, diam. 0,75-1,25 um)

• Unicelulares (colonias o filamentos con células especializadas)

Las Bacterias

• Viven en plantas, animales, suelos, estanques, lagos, arroyos, fuentes hidrotermales, glaciares, polos, etc.

• Principales desintegradoras en

casi todos los ecosistemas

• Aerobias, anaerobias y

Facultativas

Las Bacterias

• Más de 500 especies han sido encontradas en la flora oral. Una boca puede tener 25 especies diferentes

• Un mililitro de saliva puede contener hasta 40 millones (4 X 107) células bacterianas

• Es normal tener 108 células bacterianas por mililitro en el ciego (la parte inicial del colon) y muchas de estas especies son diferentes a las que se encuentran en la boca

Formas

• Muchas presentan formas irregulares

• Existen tres formas comunes: esférica, cilíndrica y espiral. Esférica:

Formas

Cilíndrica:

- Bacilos (aislados o en largas cadenas)

- Cocobacilos

- Desarrollan endosporas para resistir

Formas

Helicoidales:

- Vibriones (en forma una hélice corta)

- Espirilos (hélice larga y rígida)

- Espiroquetas (hélice larga y flexibles)

Célula Procariótica

• Carecen de organelos rodeados por membrana (núcleo, mitocondrias, cloroplastos, RE, Aparato de Golgi ni lisosomas)

• Posee ribosomas y gránulos de almacenamiento (glucógeno, lípidos)

• La superficie de la célula suele estar cubierta por una pared celular

• Posee las enzimas necesarias para la respiración, fotosíntesis o fijación de nitrógeno y

pueden estar adheridos a la membrana plasmática.

Pared Celular

• Presente en todas las bacterias

• Envoltura rígida exterior a la membrana

• Da forma a la bacteria

• Soporta las fuertes presiones osmóticas

• Componentes fundamentales : peptidoglucanos o mureínas (anillos de polisacáridos complejos enlazados con oligopéptidos)

Pared Celular

• Gram negativas o Gram positivas

• Gram positivas: la red de peptidoglucanos origina varias capas superpuestas (gruesa y homogénea y no hay membrana externa)

• Gram negativas: una sola capa de péptidoglucanos sobre la que se dispone una membrana externa (una capa de fosfolípidos y otra de glicolípidos)

Pared Celular

• La propiedad de teñirse o no de violeta oscuro (Gram positivas o

Gram negativas) es un criterio de clasificación

• Gram-positivas y Gram-negativas captan la misma cantidad de

cristal violeta (CV) e iodo (I).

• El complejo CV-I es atrapado dentro de la célula Gram positiva por

la deshidratación y la reducción del tamaño de los poros de la pared

resultante del proceso de lavado con solvente.

• En contraste en las Gram negativas la fina (y probablemente discontinua) capa de peptidoglicano no impide la extracción por el solvente del complejo.

Pared Celular

Tinción Gram

• Fijación con calor

• El cristal violeta penetra en todas las células bacterianas (Gram positivas y negativas).

• El I2 entra en las células y forma un complejo insoluble en solución acuosa con el cristal violeta.

• Alcohol-acetona para la decoloración, ya que es soluble el complejo I2/cristal violeta.

• Gram positivos no se decoloran, mientras que los Gram negativos sí lo hacen.

• Para poner de manifiesto las Gram negativas se utiliza una coloración de contraste (safranina)

• Gram negativas son rojas y las

Gram positivas son azules.

Tinción Gram

1. Prepare un frotis del cultivo.

2. Cuando estén listos, tiña como sigue:

a) Cubra completamente el frotis con violeta de genciana y espere un minuto (por reloj). No deje que se seque ni ponga muy poco colorante. Lave cuidadosamente con agua corriente. b) Cubra el frotis con yodo Gram por un minuto. Lave cuidadosamente con agua corriente.

c) Decolore gota a gota con alcohol acetona hasta que salga transparente. Aproximadamente use 10 gotas. Este proceso debe cubrir todo el frotis, de otra manera quedarían espacios

sin decolorar y producirían resultados falsos. Lave con agua cuidadosamente.

d) Cubra con safranina por un minuto. Lave cuidadosamente con agua corriente. Seque por presión con un pedazo de papel

...