Prueba de toxicidad de extractos
Enviado por 4220441818 • 20 de Mayo de 2022 • Documentos de Investigación • 409 Palabras (2 Páginas) • 39 Visitas
PRUEBA DE TOXICIDAD
El ensayo se realizará con larvas nauplio II de Artemia salina (Leach) (Método modificado de McLaughlin, 1991).
a) Obtención del cultivo de Artemia salina.
Se preparará 500 mL de solución salina al 0.5% con agua destilada. La solución se transferirá en un matráz de 1 L. A continuación se adiconarán los quistes de A. salina (aproximadamente los que ocupen un volumen de 1 cm3). Además se colocará una bomba de aire (para pecera) para mantener el cultivo oxigenado.
El cultivo se colocará en condiciones controladas bajo luz blanca durante 48 horas a 25 ºC.
Transcurrido el tiempo las larvas nauplio están listas para el ensayo.
b) Preparación de las concentraciones de extracto.
Con el extracto etanólico se preparán 30 mL una solución patrón con una concentración de 1000 µg/mL, como solvente se utilizará solución salina al 0.5%.
A partir de la solución patrón, se tomarán las alícuotas necesarias para obtener las concentraciones siguientes: 0, 10, 25, 50, 75, 100, 250, 500, 750, 1000 µg/mL. Las concentraciones se prepararán por triplicado.
Concentración (µg/mL) | x10 | Volumen de solución patrón | Volumen de solución salina al 0.5% | Volumen final | ||
(µL) | (mL) | (µL) | (mL) | (mL) | ||
0 | 0 | 0 | 0.0 | 10000 | 10.0 | 10 |
10 | 100 | 100 | 0.1 | 9900 | 9.9 | 10 |
25 | 250 | 250 | 0.25 | 9750 | 9.75 | 10 |
50 | 500 | 500 | 0.5 | 9500 | 9.5 | 10 |
75 | 750 | 750 | 0.75 | 9250 | 9.25 | 10 |
100 | 1000 | 1000 | 1.0 | 9000 | 9.0 | 10 |
250 | 2500 | 2500 | 2.5 | 7500 | 7.5 | 10 |
500 | 5000 | 5000 | 5.0 | 5000 | 5.0 | 10 |
750 | 7500 | 7500 | 7.5 | 2500 | 2.5 | 10 |
1000 | 10000 | 10000 | 10.0 | 0.0 | 0.0 | 10 |
...