Tipos de centrifugación

Tipos de centrifugación

La centrifugación se puede llevar a cabo según su propósito a escala preparativa o escala analítica. La primera se utiliza para aislar partículas para su aprovechamiento posterior y la segunda permite determinar propiedades físicas como la velocidad de sedimentación o el peso molecular.

Existen 3 tipos:

• El primero es la centrifugación diferencia esta aprovecha la diferencia de velocidad de sedimentación de las distintas moléculas de una mezcla. Así, las partículas de densidades similares sedimentan juntas, de esta se obtiene solo dos fracciones el sobrenadante y el sedimento, generalmente se realiza en rotor angular.

• El segundo es la centrifugación zonal en este la muestra se aplica en una capa delgada sobre el medio de centrifugación, que es un gradiente de densidades previamente formado este se crea mediante un gradiente de concentración de un componente adecuado. Se usan para ello sacarosa, cloruro de cesio, albúmina, suero fetal bovino... entre otros. Se coloca el tubo en un rotor basculante que, bajo la fuerza centrífuga, hará que las partículas sedimentan a través del gradiente concentrándose en bandas.

• El tercero es la centrifugación isopícnica separa las partículas en un gradiente de densidades en función de la densidad de las mismas. Las partículas se mueven en el gradiente hasta que llegan a un punto donde la densidad de éstas y la del gradiente son idénticas Lo más frecuente es mezclar la muestra con el material que formará el gradiente y generar un gradiente autoformado a la vez que se hace la separación. Para esto se requieren velocidades muy altas (ultra centrifugación) y el tiempo de centrifugación es lo suficientemente largo (hasta 1 o 2 días) como para que se alcance el equilibrio de sedimentación.

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