Deixar refredar i afegir un petit volum d’aigua (en el tub després de perdre els vapors d’amoníac s’ha format un compost denominat BIURET, aquesta substància amb NaOH i SO4Cu donarà uns complexos de color violeta, semblants als que es formaran a

Material:

.-  solució diluïda de clara d’ou al 5% 

.-  urea cristal·litzada

.-  aigua destil·lada , maltosa, glucosa...

.-  Reactiu de Biuret (NaOH al 40% i SO4Cu al 1%)

Procediment:

1. Col·locar en un tub d’assaig “pyrex” urea en cristalls i escalfar a la flama.

2. Observar la seva fusió i descomposició donant vapors d’amoníac (això es pot detectar tant per l’olor com amb paper indicador de pH posat a la boca del tub i es tenyirà de color blau)

3. Deixar refredar i afegir un petit volum d’aigua (en el tub després de perdre els vapors d’amoníac s’ha format un compost denominat BIURET, aquesta substància amb NaOH i SO4Cu donarà uns complexos de color violeta, semblants als que es formaran amb les proteïnes degut a la presència d’enllaços peptídics)

4. Retolar 3 tubs més:

        Tub 1: 10 mL solució d’ovoalbúmina al 5 %.

        Tub 2: mateix volum d’aigua.

        Tub 3: mateix volum de maltosa o glucosa.

5. Afegir a cada tub 1mL de NaOH al 40 % i barrejar-ho.

6. Afegir a cada tub gota a gota SO4Cu al 1 %.

7. Descriu què s’observa i anota els resultats.

Lectura de la prova

.- aparició color violeta.................Biuret positiu

.- no   “        “         “     .................Biuret negatiu

Fonament

Els pèptids i les proteïnes donen una reacció acolorida semblant a la què dóna el BIURET al trobar-se en presència d’ions cúprics i en un medi alcalí, què no donen els aminoàcids lliures.

El BIURET, en medi alcalí, forma uns complexos de coordinació amb el coure de color blau-morat, característic semblant als obtinguts amb les proteïnes en condicions anàlogues, la reacció es quantitativa i permet valorar les proteïnes en relació amb els seus enllaços peptídics.

El BIURET té en la seva molècula dos enllaços amida successius, de manera homòloga al que es dóna en les proteïnes, on coexisteixen nombrosos enllaços peptídics successius.

Resultats:

[pic 2]

[pic 3]

[pic 4]

a) Donaria positiva la reacció de Biuret si al tub d’assaig hi

         hagués aminoàcids lliures? Justifica la teva resposta.

     b) Per què el color violeta en el tub on hi ha ovoalbúmina es fa

         més intens a mesura que posem més volum de CuSO4?

     d) Donaria positiva la reacció de Biuret si al tub d’assaig hi

...