Deixar refredar i afegir un petit volum d’aigua (en el tub després de perdre els vapors d’amoníac s’ha format un compost denominat BIURET, aquesta substància amb NaOH i SO4Cu donarà uns complexos de color violeta, semblants als que es formaran a

Material:

.-  solució diluïda de clara d’ou al 5% 

.-  urea cristal·litzada

.-  aigua destil·lada , maltosa, glucosa...

.-  Reactiu de Biuret (NaOH al 40% i SO4Cu al 1%)

Procediment:

1. Col·locar en un tub d’assaig “pyrex” urea en cristalls i escalfar a la flama.

2. Observar la seva fusió i descomposició donant vapors d’amoníac (això es pot detectar tant per l’olor com amb paper indicador de pH posat a la boca del tub i es tenyirà de color blau)

3. Deixar refredar i afegir un petit volum d’aigua (en el tub després de perdre els vapors d’amoníac s’ha format un compost denominat BIURET, aquesta substància amb NaOH i SO4Cu donarà uns complexos de color violeta, semblants als que es formaran amb les proteïnes degut a la presència d’enllaços peptídics)

4. Retolar 3 tubs més:

        Tub 1: 10 mL solució d’ovoalbúmina al 5 %.

        Tub 2: mateix volum d’aigua.

        Tub 3: mateix volum de maltosa o glucosa.

5. Afegir a cada tub 1mL de NaOH al 40 % i barrejar-ho.

6. Afegir a cada tub gota a gota SO4Cu al 1 %.

7. Descriu què s’observa i anota els resultats.

Lectura de la prova

.- aparició color violeta.................Biuret positiu

.- no   “        “         “     .................Biuret negatiu

Fonament

Els pèptids i les proteïnes donen una reacció acolorida semblant a la què dóna el BIURET al trobar-se en presència d’ions cúprics i en un medi alcalí, què no donen els aminoàcids lliures.

El BIURET, en medi alcalí, forma uns complexos de coordinació amb el coure de color blau-morat, característic semblant als obtinguts amb les proteïnes en condicions anàlogues, la reacció es quantitativa i permet valorar les proteïnes en relació amb els seus enllaços peptídics.

...