Laboratorio cromosomas

UNIVERSIDAD DE SANTANDER-CUCUTA

PROGRAMA DE MEDICINA

PERIODO B-2018

BIOCIENCIAS II

Laboratorio 5

Tema

CITOGENETICA

CARIOTIPO HUMANO NORMAL

Objetivo (s)

• Reconocer el fundamento de la técnica de cultivo de linfocitos para obtención de metafases, identificando la función de cada uno de los componentes involucrados en dicha técnica.
• Conocer la clasificación de los diferentes cromosomas humanos, según su tamaño y  localización del centrómero.
• Aplicar la técnica para organizar un cariotipo humano a partir de la fotografía de una metafase teñida para banda G.

Fundamento

A través del cultivo de linfocitos de sangre periférica, el uso de técnicas de tinción y con ayuda del microscopio, es posible observar los cromosomas de un individuo. Estos se pueden obtener de células en profase tardía o en metafase, en las cuales cada cromosoma consta de dos cromátidas unidas por el centrómero.  La visualización e identificación de los cromosomas es usada actualmente con mucha frecuencia en estudios de investigación o para el diagnóstico de un importante número de alteraciones cromosómicas que desencadenan diversos cuadros clínicos.

Usando el colorante de Giemsa, los cromosomas se tiñen de manera homogénea (tinción universal). Con esta coloración los cromosomas se pueden distinguir por su longitud y posición del centrómero y clasificar dentro de los siete grupos, nombrados de la A a la G, localizando el cromosoma X dentro del grupo C y el cromosoma Y dentro del grupo G.

Otras técnicas como el bandeo cromosómico, denominadas comúnmente como bandas G, R, Q, permiten la identificación exacta de los pares cromosómicos y de las alteraciones estructurales de los mismos, gracias al análisis banda por banda en cada cromosoma, procedimiento  llevado a cabo utilizando el microscopio.  Luego del análisis exhaustivo de varias metafases donde se realiza una comparación detallada de los patrones de bandeo de cada cromosoma con un patrón normal, se obtiene la fotografía de una o dos metafases para dejar  registro del análisis realizado en el microscopio.  Con esta fotografía se realiza el cariotipo de la muestra analizada.  Se denomina cariotipo al complemento cromosómico de un individuo o célula, tal y como se observa en la metafase mitótica.  Para establecer el cariotipo se deben identificar cada uno de los cromosomas de la célula que se está analizando.  

En esta práctica se conocerá la técnica de cultivo celular para obtención de metafases, se visualizarán cromosomas en el microscopio y se organizará un cariotipo humano normal.

Materiales y Equipos

Ítem

Tipo

                                Descripción

1

MAT

Láminas de cromosomas humanos coloreados con tinción convencional (Giemsa) y con bandas G.

2

MAT

Fotografía de cromosomas con bandeo G y formato (imprimir anexos a cargo de los estudiantes)

3

MAT

Tijeras, pegante y colores (a cargo del estudiante)

4

MAT

Algodón y alcohol

5

MAT

Aceite de inmersión

6

EQU

Microscopio

7

EQU

Computador portátil

8

Internet : https://webs.ucm.es/info/genetica/AVG/practicas/cariotipo/cario.htm

Procedimiento

Paso

                                            Descripción

1

A partir de una fotografía de una metafase de cromosomas humanos teñidos para banda G, suministrada por el docente, organice  el cariotipo respectivo.

2

Con la ayuda del microscopio, el estudiante identificará cromosomas humanos.

Consulta

1. Resuma en un cuadro sinóptico la técnica de cultivo de linfocitos para obtención de metafases.
2. ¿En qué consiste el patrón de bandas G de los cromosomas humanos? Traer fotografía.
3. Explique que es la heterocromatina constitutiva y la eucromatina y su relación con el patrón de bandas G de los cromosomas.
4. Consulte las 5 alteraciones cromosómicas de mayor frecuencia en Colombia (mencione al menos dos fuentes bibliográficas consultadas).

Bibliografía

SALAMANCA, F. Citogenética Humana.  Fundamentos y Aplicaciones Clínicas Editorial Panamericana, México, pág. 107-116, 1998.

SILVA, E y col.  Citogenética Humana.  Manual de procedimientos. 1991. Instituto Nacional de Salud.  Red Nacional de Laboratorios.

Anexos

Fotografía de metafase humana con bandas G y formato para organizar cariotipo