La familia Neisseriaceae

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE Neisseria

La familia Neisseriaceae incluye varios géneros entre ellos el género Neisseria y Branhamella. La Neisseria son cocos gramnegativos. Algunas Neisserias son comensales y otras como N. gonorrhoeae y N. meningitidis son patógenos. En un frotís de muestra clínica coloreado con Gram., estos microorganismos se presentan como diplococos de forma arriñonada (o granos de café) y se pueden observar dentro de los Neutrófilos polimorfonucleares, esta presentación se conoce como diplococos intracelulares gramnegativos y contribuyen a la identificación de una verdadera infección.

Aunque estos cocos son aerobios estrictos desarrollan mejor en un medio enriquecido con atmósfera de 2-10% de co2. Las Neisseria patógenas son muy sensibles a las variaciones de temperatura, por la que las muestras clínicas deben ser inoculadas lo más pronto posible. Luego de 24-48 hrs. de incubación la N. gonorrhoeae forma colonias pequeñas (0.5.- 2 mm), traslucidas, grisáceas, convexas, brillantes, con bordes lisos, con frecuencia se despegaran completamente de la superficie del Agar y pueden ser mucoides o gomosas. Son autolítico

1.- Material:

 Placas con agar chocolate y Thayer Martín modificado

 Láminas

 Set. De Gram.

 Reactivo para Oxidasa

 Muestra: Uretral, cérvix y canal anal y de otros localizaciones LCR.

2.- Procedimiento:

a) Examen directo de la muestra clínica.- Hacer un frotís de la muestra y teñir con Gram.

b) Cultivo:

 Sembrar la muestra en agar chocolate y/o Thayer Martín modificado por estría y agotamiento para obtener colonias aisladas, incubar 24-48 hrs. a 37°C y con CO2 2-10%.

c) Identificación:

 Identificar las morfologías típicas de las colonias

 Realizar un Gram. De estas colonias.

d) Realizar las siguientes pruebas bioquímicas o enzimáticas.

 Test de oxidasa

 Fermentación de glucosa, maltosa, fructuosa, Sacarosa, Lactosa.

3.- Resultados:

 Anotar los resultados obtenidos en el examen directo.

 Describir las colonias típicas aisladas, morfología microscópica y reacciones bioquímicas.

Enriquecimiento

El mejor medio es el Tayer Martín.

Aislamiento

El microorganismo es autolitico y se debe sembrar rápido en los siguientes medios:

 Medios Enriquecidos

Agar chocolate

 Medios selectivos

Agar tayer Martín modificado; es altamente selectivo y contine:

Vancomicina: Inhibe los Gram +

Trimetropin: Inhibe los Proteus

Nistamina: Inhibe las levaduras

Colistina: Inhibe los Gram -

Agar New york City

Agar Martin Lewis

Después incubar a 37°C por 18- 24 horas

Identificación

1. Macromorfologica: Colonias pequeñas, traslucidas, autoliticas y brillantes.

2. Micromorfologica

COCOS GRAM -

3. Pruebas Bioquímicas

Caracteristicas Neisseria Gonorrhoeae

Oxidasa +

Glucosa +

Malato -

Lactosa -

Fructuosa -

Galactosa -

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