ADN Vegetal

PRACTICAS DE LABORATORIO

BIOQUÍMICA II

FUNDAMENTO

La extracción de ADN de una muestra celular se basa en el hecho de que los iones salinos

son atraídos hacia las cargas negativas del ADN, permitiendo su disolución y posterior

extracción de la célula. Se empieza por lisar (romper) las células mediante un detergente,

vaciándose su contenido molecular en una disolución tampón en la que se disuelve el ADN.

En ese momento, el tampón contiene ADN y todo un surtido de restos moleculares: ARN,

carbohidratos, proteínas y otras sustancias en menor proporción. Las proteínas asociadas al

ADN, de gran longitud, se habrán fraccionado en cadenas más pequeñas y separado de él

por acción del detergente. Sólo queda, por tanto, extraer el ADN de esa mezcla de tampón y

detergente, para lo cual se utiliza alcohol isoamílico.

MATERIAL Y REACTIVOS

•Muestra vegetal

•Agua (destilada o mineral)

•Sal de mesa

•Bicarbonato sódico

•Detergente líquido o shampú

•Alcohol isoamílico a 0ºC

•Batidora

•Nevera

•Colador o centrífuga

•Vaso

•Tubo de ensayo

•Varilla fina

REALIZACIÓN

1. Preparar el tampón con los siguientes ingredientes y mantener esta solución en la nevera en un baño de hielo triturado:

120 ml de agua, si es posible destilada y si no mineral.( No usar agua del grifo.)

1,5 g de sal de mesa, preferiblemente pura.

5 g de bicarbonato sódico.

5 ml de detergente líquido o champú.

2. Elegir la muestra que va a proporcionar el ADN entre los vegetales (cebolla, ajo, tomates, etc.) y cortarla en cuadraditos.

3. Triturar la muestra con un poco de agua en la batidora accionando las cuchillas a

impulsos de 10

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