Trabajo Laboratorio ‘’Extracción de ADN’’

Fundación  Educacional ‘’La Asunción’’[pic 1]

LICEO ‘’ LA ASUNCION’’

‘’Educar,Evangelizar y Servir ‘’

Trabajo Laboratorio

‘’Extracción de ADN’’

[pic 2]

                                                                                                          Integrantes : Francisca Vera

                                                                                                                                    Javiera Marquizani

                                                                                                                                    Constanza Agüero

                                                                                                                        Italo Iraira

                                                                                                                            Sofía Opazo

                                                                                                  Curso : 4to Medio B

                                                                                                                 Docente(s): Tatiana Henriquez

                                                                                                 Asignatura: Ciencias

Introducción

El Ácido desoxirribonucleico (ADN), es el material genético de todos los organismos vivos y de casi todos los virus. Es el ADN quien lleva la información necesaria para dirigir la síntesis de proteínas y la duplicación de la misma molécula. Esta biomolécula fue detectada en el núcleo celular por el investigador F.miesher en 1869, y desde los años cuarenta O. Avery y sus colaborados descrubrieron que el material genético está formado de ADN.

El ADN es una molécula formada por dos cadenas de polinucleótidos unidas por puentes de hidrógeno. Los nucleótidos que presenta son: la timina, adenina,guanina y la citosina; las cuales forman los genes, que de acuerdo a la secuencia de orden en que se encuentran determinan las características biológicas de todo ser vivo.Además ésta molécula de vida está constituida de un azúcar desoxirribosa y un grupo fosfato.

La manipulación del ADN, es uno de los ejemplos más espectaculares del avance de la aplicación de una serie de herramientas, que anteriormente no se contemplaban en el campo científico y que en la actualidad, se usan de manera rutinaria para desarrollar una amplia variedad de estudios genéticos.

Para estudiar el ADN es imprescindible aislarlo e identificarlo. Existen diferentes métodos de aislamiento, depediendo del tipo de estudios o investigación que se quiera realizar. Sin embargo todos comparten el hecho de que, debido a que la molécula se encuentra al interior de estructuras membranosas y está asociada con proteínas, se requiere usar sustancias adecuadas para obtener el ADN.

La técnica utilizada en esta actividad experimental, se  basa por un lado, en el principio de que el componente fundamental de las membranas plasmática y nuclear, son los lípidos, por lo cual se utiliza un detergente (surfactante) para romper estas estructuras y permitir la salida del ADN. Por otro lado, el ADN de vegetales y animales se encuentra asociado a proteínas de tipo histona, por lo tanto, al agregarle alcohol se precipitan las proteínas y de esta forma se obtiene al ADN como una estructura más pura.

En el presente informe se mostrarán los procedimientos que se realizaron para obtener el ADN de un trozo de fruta pulposa como el de una frutilla, kiwi,manzana,plátano y un trozo de higado de pollo (panita).

[pic 3]

Procedimiento

Materiales a ocupar:  Frutilla, kiwi, manzana, platano, hígado de pollo, ablandador de carne(enzima proteolítica), etanol, detergente coloidal, solución salina hipotónica, gradilla con 6 tubos de ensayos y un mortero.

[pic 4]

1 – Cortamos un trozo pequeño de cada fruta ( frutilla,manzana,kiwi,platano) con ayuda de un bisturi sobre una tabla de picar para no dejar residuos en la mesa de trabajo.

[pic 5]

2-Luego trituramos (maceramos), cada trozo de fruta e hígado cortado en un mortero hasta lograr que quedara totalmente molido.

[pic 6]

3- Nuestro siguiente paso fue seguir macerando pero esta vez agregamos a cada muestra te tejido animal y vegetal  solucion salina durante un periodo de tiempo de 5 minutos.

[pic 7]

4- Luego de que pasaran los 5 minutos con cada muestra solicitamos que agregaran a nuestra pasta que se formo, detergente coloidal aproximadamente 2 gotas, revolvimos y dejamos esperar nuevamente 5 minutos

5- Ya pasados los 5 minutos agregamos ablandador de carne a cada muestra unos 5 gramos aproximadamente y vaciamos una pequeña parte de cada contenido  en un tubo de ensayo para luego dejar reposar por otros 5 minutos.

[pic 8]

6- Pasado ese tiempo solicitamos etanol, en donde inclinamos cada tubo de ensayo  y lentamente vertimos el alcohol por la pares del tubo  de manera que formara una capa sobre la solución. En ese momento lo ultimo que nos quedaba era esperar poder observar el ADN y que nuestro experimento haya funcionado, lo que gracias a seguir los pasos correctamente nos resulto con éxito.

[pic 9]

Quisimos poder observar mas allá este ADN y utilizamos un microscopio lo que nos llevo a eta imagen

[pic 10][pic 11]

Observacion de todas las muestras

[pic 12]

En primera posicion de izquiera a derecha se encuentra la panita, platano, manzana, kiwi y finalmente la frutilla. De todas estas muestras de tejido animal y vegetal pudimos observar perfectamente el ADN.

                                                               Analisis del resultado

1. Explique para que se utilizó?

a)Solución salina : Se añade solución salina a la muestra, la cual hará que el ADN se haga menos soluble en el extracto celular. EL ADN tiene carga negativa debido a los grupos fosfato de su estructura. Cuando se añade sal, los iones sodio con carga positiva son atraídos por la carga negativa del ADN, neutralizándose la carga del ADN. Esto permite a las moléculas de ADN unirse entre sí en vez de repelerse unas a otras.

...